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中性粒细胞呼吸爆发定量检测试剂盒简介

更新时间:2017-03-30      点击次数:3006
 中性粒细胞(PMNs)的吞噬作用在抵御细菌、真菌等病原微生物感染过程中发挥重要作用。吞噬作用过程包括几个主要阶段: 趋化,黏附,内吞,胞内氧依赖性(呼吸爆发)和氧非依赖性的杀伤。 正常条件下细菌感染后,机体PMNs被激活,PMNs吞噬和氧化功能增强是机体重要的天然免疫防御机制。因此通过观察PMNs的活化状态可以帮助了解机体细菌感染的状况。

 

AG8亚国服务(Absin)提供的试剂盒采用流式细胞仪(FMC)检测PMNs功能,用PMA作为刺激剂,以二氢若丹明作为荧光底物。中性粒细胞受刺激后产生反应性氧化物,氧化二氢若丹明为可发出荧光的若丹明123。这个反应可以由溶血素终止。产生的反应性氧化物可以用荧光强度来表示。PMNs活化和机体的天   然免疫能力。可用于研究在各种病理情况下如感染、自身免疫疾病、应急、肿瘤、手术等中中性粒细胞的功能改变及药物的效果评价。该试剂盒不仅用于人,还可以用于小鼠、大鼠、兔、狗、牛等其他种属。

 操作步骤:
1. 无菌肝素抗凝的全血50ul,加刺激剂(如PMA)50ul, 37°C 孵育15分钟。
2.加二氢若丹明25ul, 37°C避光孵育5分钟
3.溶血素用无菌去离子水1:10稀释,加稀释后的溶血素1ml ,室温避光溶血15分钟
4.PBS洗涤2次,1500rpm离心5分钟,去上清液
5.加0.5mlPBS重悬细胞,上流式细胞仪检测
 
实验结果示例图:
 
 
图1前向角、侧向角点状图谱                               图2 静止、活化中性粒细胞FL1荧光柱状图谱
AG8亚国服务(上海)生物科技有限公司
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