预染marker的具体要求

  预染marker分子量范围 – 10 种蛋白分子量范围在10 到170kDa 之间。易于使用 – 与上样缓冲液预先混合，可直接凝胶上样，无需煮沸。条带清晰 – 亮度类似，但颜色不同的条带便于观察。质量检测 – 每批次均经过SDS-PAGE 和Western blotting 验证。两个参考条带 – 70kDa 为橙色，10kDa 为绿色。与膜兼容 – Western blotting 时彩色条带将转移到膜上应用，监测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳期间蛋白的迁移。监测Western blotting 蛋白转移到膜上的情况。测定SDS 聚丙烯酰胺凝胶和Western blots 上的蛋白分子量。

  预染marker细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)。低速离心，收集细胞沉淀。用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。细胞接种于96孔培养板，一般接种密度为3000～10000个细胞/孔。