血清常见问题解答

血清小知识

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。

胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品质zui高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。

保存血清的方法

长期保存的血清必须储存于-20℃或-80℃低温冰箱中，由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。多数情况下一瓶500ml的血清不能够一次使用完毕，所以建议一次性将血清分装成一次性能够使用完毕的体积（如50ml）。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。

如何解冻血清

我们建议血清在2-8℃的冰箱过夜溶解，在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。瓶装血清解冻应采用逐步解冻法：-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天；然后移入室温，待全部溶解后再分装。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

血清中如果出现沉淀

血清中沉淀物的出现有许多种原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。

若欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不要以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

血清的热灭活

加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养胚胎干细胞（ES）细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

热灭活一般是56℃、30分钟加热已*解冻的血清，加热过程中须规则摇晃均匀。

除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。

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