凋亡检测试剂盒如何检测细胞凋亡

　　在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA（脱氧核糖核酸）片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将AnnexinV与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

　　细胞凋亡是一个形态学概念，对其形态的观察是用凋亡检测试剂盒研究凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的，起初，细胞间连接和微绒毛消失.细胞体积缩小，胞浆凝缩，内质网变疏松并与胞膜融合，形成一个个空抱，核搪体与线粒体等细胞器聚集，结构尚无明显改变，细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边，细胞核固缩呈匀一的致密物，进而断裂成碎块，此时细胞膜仍保持完整;然后，胞膜及核膜不断出芽、脱落，一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体;后，凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞如巨噬细胞、上皮细胞等吞噬、消化。在凋亡发生的全过程中，细胞膜一直保持完整。同一组织中，不同细胞发生凋亡的进程并不同步。