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淋巴细胞的分离方法有哪些?

更新时间:2020-03-17      点击次数:4638
 
  淋巴细胞分离液是一种用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细胞的密度差异,通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将淋巴细胞从人外周血或脐带血中分离出来。分离纯度:使用人淋巴细胞分离液分离淋巴细胞的分离纯度大于90%。
  淋巴细胞分离方法有哪些?主要包括粘附贴壁法,吸附柱过滤法,磁铁吸引法。
  一、粘附贴壁法:
  将已制取的单独核细胞悬浮液倾于玻璃或塑胶培养皿或偏平小瓶中,挪到37℃温箱浸泡1小时上下,淋巴细胞和粒细胞均贴于平皿内壁,而未贴壁的非粘附細胞基本上为纯淋巴细胞,继用橡皮刮去贴壁的细胞即是纯单核细胞群。因细胞也是贴壁现象,用这样的方法可以分开的淋巴细胞群中细胞进而损害。
  二、吸附柱过滤法:
  将单独核细胞悬浮液引入配有玻纤或葡聚糖疑胶的柱层中,凡有粘附潜质的细胞绝大多数被吸咐而黏滞在柱层中,从柱上洗脱下来的细胞关键是淋巴细胞。此法行之有效,对细胞很少损伤。
  三、磁铁吸引法:
  运用单核细胞具备吞噬的特点,在单独核细胞悬浮液中加直徑为3µm的颗粒,置37℃温箱里暂时性转动摇晃,待单核细胞充足吞食颗粒后,用磁石将細胞吸至管顶,顶层液中含较纯的淋巴细胞。
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