一眨眼已经到了三月中旬了,想必各位老师渡过了一个学生时代长的寒假,假是放舒服了,可这实验可怎么办呢,
怎么样才能快速结束自己的实验并有一个好的结果呢,小爱不忍大家在家里着急上火,献给大家小爱六字真言:
多 色 组 化 服 务 !
多重荧光免疫组化(mIHC)实验原理
TSA 技术 (Tyramide Signal Amplification™,酪胺信号放大技术):简单来说,用该方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。
荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。
然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,后去检测结果。
由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。
也就是说,如果用 TSA 技术,同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以进行实验,而且信号放大的倍数大大增强。
荧光法多重免疫组化,可同时进行五个颜色通道以上,这种情况下发射光谱会重叠,我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。而且还能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系,从而极大地节约珍贵的样品。
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实验步骤 | 推荐指数 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 分类 |
样本制备 | abs9134 | Formaldehyde | 25ml,500ml,1L,4L | 固定液 | |
★★★★★ | abs9179 | 4%多聚甲醛/通用型组织固定液 | 500ml | 固定液 | |
★★★ | abs9131 | Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate | 5g,100g | 处理玻片防脱片 | |
★★★ | abs9172 | Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000) | 25mg | 处理玻片防脱片 | |
★★★ | abs9135 | Gelatin | 100g,500g | 处理玻片防脱片 | |
辅助试剂 | abs9256 | 10×TBS | 500ml | 缓冲液 | |
abs952 | 10*TBST | 100ml,1L | 缓冲液 | ||
abs961 | 10×PBS缓冲液 | 500ml,500ml*10 | 缓冲液 | ||
abs962 | 1×PBS缓冲液 | 500ml,500ml*10 | 缓冲液 | ||
abs9149 | Triton X-100/曲拉通X-100 | 100ml,500ml | 缓冲液 | ||
抗原修复 | abs9145 | Pepsin(1:3000) | 50g,100g | 抗原修复液 | |
abs9118 | Proteinase K | 100mg,1g | 抗原修复液 | ||
★★★ | abs9247 | EDTA抗原修复液(50×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9207 | 冰冻切片快速抗原修复液(5×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9249 | 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9248 | 柠檬酸钠抗原修复液(50×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9208 | 细胞爬片抗原修复液(1X) | 100ml,500ml | 抗原修复液 | |
封闭 | abs933 | Goat serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | |
abs936 | Horse serum | 200ml(2*100ml) | 封闭血清 | ||
abs939 | Normal Monkey serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs937 | Normal mouse serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs946 | Rabbit serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | ||
abs947 | Rat serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs935 | The ass/donkey serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | ||
abs9155 | 牛血清白蛋白(BSA) | 50g,100g | 封闭液 | ||
抗体孵育 | ★★★★★ | abs957 | 即用型高效免疫组化二抗试剂盒 | 5ml | 二抗试剂盒 |
★★★★★ | abs929 | PAP Pen 组化笔 | 1支 | 组化笔 | |
显色/复染 | ★★★★★ | abs9210 | DAB 显色试剂盒(棕黄色,IHC) | 1kit | 显色试剂 |
★★★ | abs47047616 | DAPI染色液 | 10ml,50ml | 荧光染料 | |
abs9105 | Propidium Iodide | 5mg,10mg | 荧光染料 | ||
abs9140 | Methyl Green, 0.1% w/v aq. soln. | 100ml | 荧光染料 | ||
abs9142 | Nuclear Fast Red | 5g | 荧光染料 | ||
★★★★ | abs9217 | 苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 | 10g,25g | 荧光染料 | |
封片 | abs9177 | 中性树胶(镜检用封片剂) | 100ml | ||
abs9234 | 抗荧光淬灭封片液 | 5ml | |||
abs9235 | 抗荧光淬灭封片液(含DAPI) | 5ml,25ml | |||
abs9236 | 抗荧光淬灭封片液(含PI) | 1ml |
AG8亚国服务特色产品线(全部现货): 二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体/多肽/蛋白)... |
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