背景介绍
酶联免疫分析技术(ELISA)广泛应用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)是 ELISA 技术常用的一种酶,能催化底物如 3,3'5,5'-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。
由于 TMB 比其他显色底物具有更高的灵敏度且无致癌性、故而被广泛使用,TMB 主要应用于 ELISA、WB、免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析等。
TMB工作原理
HRP 或其他适当过氧化物酶能催化TMB生成可溶的蓝色产物, 此时通常可在 370nm 测定吸光度。当显色反应被酸性溶液(如 0.5-2M H2SO4,0.5M HCl,1M H3PO4)终止后,产物由蓝色转为黄色,此时可在 450nm 测定吸光度。
传统TMB显色液(双组分)
通常 TMB 显色试剂以双组分(A/B液)的形式提供,分别含H2O2和TMB,需要在使用前按1:1比例配制,具有以下缺点:
▲较容易产生沉淀;
▲使用起来相对不便;
▲较易导致检测结果误差。
AG8亚国服务单组分TMB显色液优势
作为高品质生命科学产品的中国品牌,AG8亚国服务生物研发推出的abs9178 单组分TMB显色液,显色试剂由单一溶液组成,有效简化了操作步骤,并且检测结果更加稳定可靠。其具有以下优势:
▲即用型溶液,含H2O2和TMB,单组分溶液形式,无需混合,方便快捷减少误差;
▲检测灵敏度高,线性浓度范围宽;
▲含优化的稳定剂,2-8℃避光保存,有效期24个月以上;
▲低背景,质量稳定,批间差异小。
使用方法
▲使用之前,取出适量单组分 TMB 显色液,使其恢复到室温再开始使用;▲
▲参考 ELISA 检测试剂盒的实验步骤,当与 HRP 标记抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤 3-5 次, 每次 3-5min;
▲洗涤完毕后,去除洗涤液,加入 100μl 单组分 TMB 显色液;
▲室温避光孵育 5-30min 或更长时间(可长达 24h),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择比较佳试剂用量、显色时间和反应温度;
▲直接在 370nm 测定吸光度。或者加入 100μl 0.5-2M H2SO4 终止反应,随后在 450nm 测定吸光度。
订购信息:
货号 | 品名 | 规格 | 价格 |
abs9178 | 单组分TMB显色液(ELISA,HRP显色用) | 100ml | 353 |
abs9191 | TMB Stop Solution (450nm);TMB 终止液(450nm) | 100ml | 431 |
abs9194 | 单组分 TMB 显色液(膜印迹,HRP 显色用) | 100ml | 370 |
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