全国服务咨询热线:

article技术文章
首页 > 技术文章 > 多重免疫组化VS免疫荧光

多重免疫组化VS免疫荧光

更新时间:2020-12-17      点击次数:1895

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。


多重免疫组化(mIHC):主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积,与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合,经几次这样的循环放大,可以结合大量的酶分子or荧光基团,结果使其检测信号得到几何级放大。


mIHC和IP的区别:

 多重免疫组化(mIHC)免疫荧光(IP)
靶点数量可同时染色7色(含dapi)一般标记三种(含dapi)大于三种效果差
一抗种类同一种属的不同抗体即可满足要求不同种属的不同抗体
二抗 种类不同种属的不同抗体连接荧光探针的不同种属二抗
染色策略分步染色,多次重复进行免疫组化操作样本抗原的空间位置的差异,需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异,染色过程复杂、多变  
染色效果高染色分辨率和染色特异性,信号强度更强,更稳定,淬灭时间更长,无背景影响,各靶点的信噪比大大提高,尤其适合组织基于单细胞的定量分析亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响,背景较高,对基于单细胞的定量分析不利。
实验成本1同一种属的一抗和二抗,价格相对便宜。
2简单的染色策略和无需任何重复的预实验,即可掌握整个染色技术,大大缩小了预实验的材料损耗。 
3一抗和二抗工作浓度更低,单次费用更低
1不同种属的抗体价格存在差异,一般种属稀少的价格高。 
2不同种属的二抗,价格存在差异,一般稀少的种属价格高。
3寻找合适的染色策略,复杂的多次重复的预实验大大的增加了实验成本
应用范围二抗具备通用性,因此实验室中所有的研究领域均可使用二抗不具备通用性,实验室中应用领域受到局限
 

相关产品和服务推荐:

多重荧光免疫组化染色试剂盒

多重荧光免疫组化服务
 

货号产品名称
abs50012四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
abs50013五色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
abs50014六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
abs50015七色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗)
abs50028四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
abs50029五色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
abs50030六色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
abs50031七色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗)
 

Absin特色产品线(全部现货):
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

AG8亚国服务(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:wulan@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息