mIHC在结直肠癌转移机制方面的应用

mIHC在结直肠癌转移机制方面的应用分享：
 

免疫选择条件下肿瘤转移的时空演化——作者运用纵向数据对比研究了免疫微环境如何影响结直肠癌在不同转移器官中的肿瘤演化。通过多重分析，作者还发现转移过程中的克隆进化模式取决于转移部位的免疫环境。 
文章展示了多重荧光免疫组化技术的多种应用和数据分析策略，今天我们就来详细解读一下。 

文章利用了多指标和多分析策略来对免疫逃逸机制进行分析，建立了肿瘤转移的免疫评价体系。尤其是作者对Ki67+肿瘤细胞和CD3+细胞之间的空间邻近性分析，使得我们可以观察到新抗原缺失的新的遗传证据。同时还揭示了复发风险与免疫得分、免疫编辑和肿瘤负荷之间的关系。 

两例大肠癌患者P210和P45的生物标本收集点解剖图。从转移灶M8（a和b，P45）切出两个连续的玻片。多区域切除标本取自M07的一个大的肿瘤组织（M07n）及其周围的肿瘤组织，以及P210患者的一个巨大的转移瘤，M10（四个位置b1–4，尺寸25 mm）。 

作者用三个指标来量化免疫浸润：全玻片免疫细胞密度（WS）、三个浸润密度比较高的区域即热点密度（HSs），肿瘤中心（CT）CD3+/CD8+T细胞密度及其浸润边缘（IM）的免疫得分。作者运用一组7指标（单张4指标5色）的多重荧光免疫组化片子绘制了肿瘤微环境中免疫细胞的空间分布图。 

肿瘤微环境中T细胞（橙色）和增殖性肿瘤细胞（蓝色，CK+Ki67+）的空间分布模式图。——两点之间的连接表示近距离细胞。LoNo、HiNo和HiYes三组的分布图显示T细胞和肿瘤细胞的短距离在减少。Pies图显示了在CT观察到的增殖性（顶部）和非增殖性肿瘤细胞（底部）旁边的CD3 T细胞百分比，无论是增殖性还是非增殖性肿瘤细胞附近，T细胞都在增多。星号则强调了样本组之间在比例上的显著差异。 
多重荧光免疫组化图提供了很好的空间定位佐证。 

多重荧光免疫组化文献解读——总结

基于以上研究成果，作者提出了一个解释肿瘤转移进展的平行选择模型，其中分支可以追溯到免疫逃逸克隆。这一发现有助于提高我们对肿瘤扩散的认识和免疫治疗学的发展。

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多六指标七色（含DAPI）的多色免疫组化服务（芯片多四指标五色），样本涵盖石蜡切片、冰冻切片及组织芯片（TMA），组织大片请提供单块组织切片，FFPE样本，厚度3-5um。正式实验是每例2张，1张备用。预实验样本数量根据预实验方案定。

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1.五色及以下提供全片200X（相当于物镜20X，目镜10X）原图，六七色提供视野200X图片，选定视野一般默认3视野，超过视野单独收费，收费标准根据具体情况订，提供看图软件可在客户端打开。数据上传网盘1G以内，或用U盘寄送1G以上。
2.客户区域的单细胞分析结果：

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• 双阳性细胞占有核细胞百分比，密度。
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