mIHC在肿瘤免疫浸润和趋化因子受体表达研究的应用

mIHC在肿瘤免疫浸润和趋化因子受体表达研究的应用：
 

多重荧光免疫组化技术（mIHC）利用酪氨信号放大技术（TSA），对不同抗原进行多轮次染色标记，可对单一切片进行至多六指标七色的染色，对于研究多种细胞之间的原位相互作用很有帮助，涉及到研究多细胞或多指标之间相互作用的领域都可以采用mIHC的技术替代传统的IHC或IF，来获得更高通量的研究结果。主要的应用领域如下图所示： 
文章展示了多重荧光免疫组化技术的多种应用和数据分析策略，今天我们就来详细解读一下。

在mIHC的发展中，大多数应用mIHC的研究集中在肿瘤相关领域，肿瘤微环境及药效评估方面应用尤其多，之前的文章中小编也已经为大家多次分享了相关应用，感兴趣的小伙伴们可以查阅之前的文章。 
今天再和大家分享一篇多重荧光免疫组化肿瘤免疫浸润和趋化因子受体表达研究的应用，帮助大家更好的理解mIHC。

这项亚研究利用多重免疫组化(mIHC)和转录组分析，从7个可用的2期临床试验患者中筛选匹配的治疗前后肿瘤标本，研究新辅助IRX-2导致LI增加的机制。多重免疫组化显示cd68表达细胞(5例)、t细胞密度(4例)和PDL1平均荧光强度(4例)显著增加。与IRX-2激活多种免疫细胞一致，转录组分析显示NK细胞、B细胞、CD4C T细胞、CD8C T细胞和树突状细胞相关基因的表达平均增加，而中性粒细胞相关基因的表达则没有增加。大多数免疫亚群基因的平均表达增加，比较明显的是B细胞和树突状细胞(2 ~ 3倍)。

图1到7中的分布图显示了每个患者切除前和切除后匹配的肿瘤标本的免疫亚群基因表达谱。多重免疫组化图像显示了IRX-2治疗前后肿瘤组织中免疫细胞种类的数量和分布的变化。在大多数情况下，个体患者的数据证明了多重免疫组化和转录组分析结果之间的一致性。数据显示，在反应程度方面存在异质性，7例患者中有6例患者治疗后CD3C T细胞和CD68C巨噬细胞明显增加。

作者研究了在7个亚研究患者中，IRX-2治疗前后PDL1平均荧光强度(MFI)的总体变化。 7例患者中有2例Foxp3基因表达下降。Foxp3基因的平均表达从治疗前活检的7.17下降到切除肿瘤样本的7.03 (log2量表)，7例患者中有4例CD4CFoxp3C细胞通过多重免疫组化检测下降

mIHC方法可以允许在一张切片上同时标记多种marker，可以原位的展现多种细胞之间的相互作用，在临床科研和疾病诊断中都有很大的潜力，今天小编给大家分析的在肾脏移植排异反应研究中的应用就是如此，mIHC方法的应用，帮助科学家发现更精细的免疫细胞募集区域，为探秘临床减轻排异反应提供了更多可能性。
今天的分享就到这了，感兴趣的小伙伴们可以关注AG8亚国服务的多重荧光免疫组化试剂盒及实验服务，相信看文章的你们也可以得到这样漂亮实验结果和好的实验发现！

【AG8亚国服务mIHC服务】

* 我们可以提供的服务：
Absin多重荧光免疫组化服务提供预实验验证-染色-拍照-分析全过程。
高达六指标七色（含DAPI）的多色免疫组化服务（芯片高达四指标五色），样本涵盖石蜡切片、冰冻切片及组织芯片（TMA），组织大片请提供单块组织切片，FFPE样本，厚度3-5um。正式实验比较好每例2张，1张备用。预实验样本数量根据预实验方案定。

(* 所有抗体指标需要您提供)

* 我们可以提供的服务结果：

1.五色及以下提供全片200X（相当于物镜20X，目镜10X）原图，六七色提供视野200X图片，选定视野一般默认3视野，超过视野单独收费，收费标准根据具体情况订，提供看图软件可在客户端打开。数据上传网盘1G以内，或用U盘寄送1G以上。
2.客户要求区域的单细胞分析结果：

• 单阳性细胞占有核细胞百分比，密度。
• 双阳性细胞占有核细胞百分比，密度。
• 组织面积和特定病理形态面积计算。
• TMA提供每个芯点的以上定量结果。

Absin多色试剂盒（abs50032） 

组分信息： SuperNova系列染料（可选）、信号放大反应液、鼠兔通用型或者抗兔抗鼠HRP标记二抗、抗荧光淬灭封片剂、DAPI
产品特点： 可快速完成高达六指标七色的荧光多标记； 染料经过优化处理，相比普通染料，强度更高，持续时间更长； 有组化经验即可操作，染色无需特殊仪器，提供详细的protocol