WB——预制胶简介

蛋白电泳中*的一环就是配胶，常规配胶往往需要耗费数个小时的时间，还要面临漏液、凝胶不均匀（微笑线）、气泡（皱眉线）等等问题，甚至有时候为了制备一块胶以获得一张好看的电泳图片，要多耗费几天的时间；除了配制麻烦，原料试剂还有毒性，会对对配胶人员的身体造成危害。预制胶的出现，正是为了解决自己配胶存在的种种麻烦。

 微笑线和皱眉线

固定胶or梯度胶？

8%、10%、12%、4-12%、4-20%......这其实指的是聚丙烯酰胺的浓度，不同浓度意味着对分离的蛋白分子量范围的限制。前三者指的是固定浓度的预制胶，而后面二者则是梯度胶。
凝胶梯度是通过梯度混合器形成的，高浓度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液浓度呈梯度下降，因此在凝胶的顶部孔径较大，而在凝胶的底部孔径较小。固定胶只能分离其分离范围内的蛋白质，过大过小都不行，而梯度胶则不存在这种局限性，大分子在顶部分离，小分子在底部分离；由于梯度凝胶孔径逐步变小，在蛋白质不能通透的孔径附近对蛋白有浓缩作用，所以电泳后形成很窄的区带，可以分辨出分子量相差较小的蛋白质，而这类蛋白往往在固定胶无法完成分离。

Absin BIS-Tris Gels预制胶优势：

▲ BIS-Tris Gels是一款高性能的小型聚丙烯酰胺凝胶，相比于传统的Tris-Gly凝胶，Bis-Tris凝胶偏酸性，不容易降解，在4-25℃的条件下能够长时间储存
▲ 不含SDS，根据使用的电泳缓冲液类型可进行变性或非变性电泳实验
▲ 含有1.5厘米高的4%浓缩胶，可以有效确保获得非常锐利的条带
▲ 胶板印有孔道标识，加样更方便
▲ 电泳时间短，可支持150V电压，30-45min即可完成电泳过程
▲ 边缘效应弱，条带更平直；相对于Tris-Glycine体系，Bis-Tris体系凝胶条带位置正确性更高。
▲ 不用自行配制，开袋即用，安全省事便捷
▲ 避免丙烯酰胺毒害实验人员可能性
▲ 批量生产，胶与胶间重复性好，质量稳定，避免手工灌胶的差异性

预制胶Q&A：

Q：在使用过程中有哪些需要注意的地方？
W：必须使用配套的MOPS/MES缓冲液，若使用其他体系的缓冲液，会造成条带异常（本品赠送20×MOPS电泳液）
Q：变性胶和非变性胶的区别是什么？
W：变性胶与非变性的凝胶成分是一样的，均不含SDS，两者的区别在于变性胶的running buffer中含SDS, 而非变性胶的running buffer不含SDS，老师可以根据自己的需求配制变性或非变性的running buffer。
Q：电泳时，分子量较小的marker和条带分不开怎么办？
W：这个问题的原因是分离胶浓度较低造成的，不同浓度的分离胶分离范围不同（见下图），选用较高浓度的分离胶有助于小分子量条带更加分散，便于观察。

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