三种细胞消化的方式你知道哪个

　　常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化(难消化细胞例外)即可。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求*。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白。

　　细胞消化三种方式

　　机械消化法

　　直接用液体吹打或用刮刀，施予外力让细胞与培养底物分离；适用于贴壁性弱的细胞传代，但相较于其它消化方法，这种外力无法量化控制，细胞分散效果差，且可能会造成大量细胞破损，使内容物释放到培养基，进而影响细胞传代状态。

　　离子螯合法

　　细胞膜表面蛋白大多需要钙、镁离子来维持与胞外基质的稳定键结，当然也包含各种黏附蛋白(例：整合素、钙黏着蛋白、桥粒等)，螯合剂会在不破坏细胞膜表面蛋白的状况下，抽离这些离子，使黏附蛋白失活而减少细胞-细胞间及细胞-底物间的连接作用，让细胞较容易在施予外力时，脱离培养底物并促进细胞分散。

　　0.02% EDTA是细胞传代常用的离子螯合剂，在37℃作用效果很佳(消化较敏感的细胞可在4℃作用)，适用于消化一般贴壁性细胞或细胞表面标记实验细胞。

　　但EDTA无法用血清终止其反应，所以在消化细胞后必须用缓冲盐溶液(如：PBS)清洗离心，以免影响后续细胞贴盘效果。

　　酶消化法

　　用蛋白水解酶消化连接细胞及培养底物的蛋白质，适用于消化贴壁性稍强的细胞。