A:类器官数量不足或体积较小时: 离心5min弃去上清,添加适量小肠类器官缓冲液重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第3步。
B:类器官数量较多或体积较大时:离心5min弃去上清,添加适量类器官传代消化液D消化2-3min,添加小肠类器官缓冲液终止消化,离心5min弃去混合液,添加适量小肠类器官缓冲液重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第3步。
类器官收集后,添加基质胶重悬,每孔25μl基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min添加500μl小肠类器官培养基。
Q1:类器官培养一代需要多长时间?
A:一般需要5-7天,长得快可3-5天。
Q2: 初始量样本量10*5,活性大于90%,可以培养出多少类器官?
A:培养一代,一般是24孔板的10个孔。
Q3:原代培养中消化下来的细胞是只有干细胞吗?
A:消化下来的细胞包含各个种类的细胞,但是能培养成类器官的只有成体干细胞和肿瘤干细胞,没有干性的细胞在培养过程中不会增殖分化,养的过程会死掉。
Q4:想要CTC培养,需要多少样本量呢?
A:至少50+个CTC,取样时可以多取一些血,CTC细胞占比比较少。
Q5:类器官量多小的时候不需要加消化液?
A:一般是100um以下。
Q6:如果要做药筛需要额外去除基质胶和培养基吗?
A:和传代培养铺板一样,药用培养基稀释就可以。
Q7:类器官培养一定需要基质胶吗?
A:基质胶主要是为类器官提供支撑作用和营养物质,基质胶主要成分有laminin,collagen IV,heparan sulfate proteoglycans。
Q8:取材时为什么剔除脂肪组织?脂肪肝可以做类器官培养吗?
A:脂肪组织影响后续消化分离得到的干细胞纯度,脂肪肝也是可以做类器官培养的,消化前可以多清洗几次,去掉表面脂肪。
Q9:类器官可以直接用细胞系培养吗?
A:用细胞系培养的不能成为类器官,只能称之为细胞球。
货号 | 品名 | 规格 |
abs9514 | Organotial小鼠肠类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9516 | Organotial小鼠肝类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9515 | Organotial小鼠肺类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9517 | Organotial小鼠胰腺类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9446 | Organotial乳腺癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9448 | Organotial子宫内膜癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9445 | Organotial结直肠癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9444 | Organotial肝癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9443 | Organotial肺癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9449 | Organotial胃癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
abs9447 | Organotial胰腺癌类器官培养基试剂盒 | 1kit |
货号 | 品名 | 规格 | 周期 |
abs9490 | 基质胶(标准型、含酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9491 | 基质胶(标准型、无酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9492 | 基质胶(高浓度、含酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9493 | 基质胶(高浓度、无酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9494 | 基质胶(低因子、含酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9495 | 基质胶(低因子、无酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9496 | 基质胶(IPS验证无酚红) | 1.5ml*4 | 现货 |
abs9497 | 基质胶(高浓度、低因子、含酚红) | 1.5ml*8 | 现货 |
abs9498 | 基质胶(高浓度,无酚红,低生长因子) | 1.5ml*8 | 现货 |
详见:类器官原代培养全流程
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