全国服务咨询热线:

article技术文章
首页 > 技术文章 > HepG2细胞培养攻略

HepG2细胞培养攻略

更新时间:2023-03-02      点击次数:1468

HepG2 细胞是来源于一个15岁白人的肝癌组织;分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、转铁蛋白等;模式染色体数为55;该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤;是一个合适的转染宿主;表达标志物包括胰岛素受体;胰岛素样生长因子 II (IGF II)受体。呈上皮样;贴壁,传代比例 1:4 - 1:6;营养体系是MEM+10% FBS。




  名称

HepG2(人肝癌细胞)

  形态

上皮样

生长特性

贴壁;传代比例 1:4 - 1:6

营养体系

MEM(abs9503)+10% FBS(abs972)+1% PS(abs9244)



图1 HepG2 人肝癌细胞

首先我们讨论的是HepG2长得怎么才算好呢?相比于其它细胞,HepG2长得相对ugly一些,这个细胞状态好的形态学表现有哪些?我们来看一组对比(图3和图4)。

差的细胞特点:细胞裂解,背景脏;

好的细胞特点:细胞克隆成岛状,背景干净,对比是很鲜明的。




接下来我们讨论一下HepG2细胞消化问题。在体外培养时,该细胞容易聚团呈岛状(如图4所示),且如果长得过满,轻度消化就成片下来,容易成团。


图4 HepG2细胞聚团增殖成呈岛状分布

传代时,怎样才能使HepG2消化成单个细胞?

有两种解决办法:

※ 融合率达到80%即可传代,长太满容易成片脱落;

※ 先用胰酶消化约3分钟,用完培终止消化作用,然后用移液管将细胞悬液吸起,将管口稍微用力按在培养瓶底部,用力快速将细胞悬液挤出(可重复一次),可有效减轻细胞聚团。

HepG2是最为常用肝癌细胞系之一,主要用于肝脏研究

肝炎病毒研究:HepG2是常用的研究HBV和HCV细胞系模型,利用CRISPR/Cas9构建基因敲除HepG2的HBV感染细胞模型细胞,为治愈乙肝提供新思路。体外肝癌(HCC)模型:HepG2中p53抑癌基因无突变,因此可用于研究p53与肝细胞癌(HCC)的密切关系,以及HCC的发病、诊治、预防。

药物研究:肝脏是人体内药物代谢的最主要器官,也是重要的解毒器官。HepG2细胞系无论在形态上还是功能上都更接近于人的肝组织,该细胞系常用于药物代谢和肝毒性研究。

本期讲解就到这里了,下一期您想了解哪种细胞的培养攻略呢?欢迎留言评论哦。如有细胞培养问题,欢迎扫码加入我们微信群哦。

注:图源网络和客户,仅供参考学习用



本期小爱细胞培养类产品推荐

货号

品名

规格

abs981

胎牛血清(特级)

500ml

abs972

胎牛血清(优级)

500ml

abs974

胎牛血清(标准级)

500ml

abs9483

高糖DMEM培养基

500ml

abs9484

RPMI-1640培养基

500ml

abs9505

MEM培养基

500ml

abs9506

α-MEM培养基

500ml

abs9554

Ham's F-12培养基

500ml

abs9563

Ham's F-12K培养基

500ml

abs9561

DMEM/F-12培养基

500ml

abs962

PBS缓冲液

500ml

abs970

D-PBS缓冲液(不含 Ca2+ Mg2+

500ml

abs971

D-PBS缓冲液(含 Ca2+ Mg2+)

500ml

abs9257

Hanks平衡盐溶液(不含 Ca2+ Mg2+)

500ml

abs9258

Hanks平衡盐溶液(含 Ca2+ Mg2+)

500ml

abs47014938

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) ,含酚红

100ml

abs47047375

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚红

100mL

abs9479

无DMSO无血清细胞冻存液

100mL

abs9417

无血清细胞冻存液

100mL

abs9473

细胞冻存液(含血清)

100mL

abs9474

组织保存液

100ml

abs9480

组织冻存试剂盒

30ml

abs9486

模具

1个/套

abs9487

小刀

5片/包

abs9481

组织复苏试剂盒

50ml

abs42020125

卡那霉素B硫酸盐

250mg

abs42018967

硫酸庆大霉素溶液

10ml

abs9244

青链双抗

100ml

abs9245

青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液

100ml

abs42013298

两性霉素B

1g

abs44071148

制霉菌素

1g

abs9246

青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液

100ml

abs9252

支原体检测试剂盒

100T

abs9375

支原体清除试剂

200uL×5

abs9376

支原体预防

500uL×4

abs816578

环丙沙星盐酸盐

500mg

abs9374

水盘抑菌剂

20ml

abs9371

水浴锅抑菌剂

100ml

abs9372

培养箱除菌剂

480ml

abs9373

细胞房除菌剂

480ml

 

Absin特色产品线:
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

AG8亚国服务(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:wulan@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息