探秘黑胶虫（下）

上一集探秘黑胶虫（上），我们主要讨论了部分黑胶虫样本鉴定为细菌这一情况，此外，还有一部分黑胶虫样本鉴定为支原体。这里举两个典型黑胶虫鉴定结果给大家分享：

图1 固体培养基上的猪鼻支原体集落

鉴定结果：样本7，12，18鉴定为 Mycoplasma hyorhinis（猪鼻支原体）

大小：0.15-0.3um

感染宿主：其感染猪的上呼吸系统的上皮细胞，通过口鼻途径传播。小猪可以被母猪或它们的同伴（无症状携带者）感染。

污染细胞途径：推测胰蛋白酶主要是从猪的胰脏提取，纯化获得的结晶，再制成的冻干制剂，过滤除菌不当的胰酶溶液可能携带猪鼻支原体，建议大家买值得信赖的胰酶，降低污染风险。

图2 固体培养基上的牛支原体集落

鉴定结果：样本23鉴定为 Mycoplasma bovis（牛支原体）；

大小：0.15-0.3um

感染宿主：主要寄生于牛体内，感染部位广泛，感染牛的呼吸道，会引起肺炎、中耳炎、关节炎、结膜炎。

污染细胞途径：细胞增殖的主要营养之一就是胎牛血清。胎牛血清来源于动物，其主要通过0.1um滤膜过滤除菌。如果血源及过滤除菌不当，就会给细胞带来潜在的支原体污染，因此建议大家购买值得信赖的胎牛血清。

接下来我们分析一下，上集中我们介绍了常见的黑胶虫污染特征有活跃游动，旋转梭动，原地颤动，这三种最常见的污染现象。支原体不像细菌，没有可用于游动的鞭毛，显然不太可能是活跃游动或旋转梭动两种现象。被鉴定为支原体污染的样本，极有可能是这种情况的黑胶虫样本—我们看到的黑胶虫在液体中原地颤动。并且支原体是目前已知的最小的原核生物，要在电子显微镜下才能观察，我们能看到原地颤动的黑点极有可能是支原体集落。

首先，我们可以先看几组可能被大家误认为是“黑胶虫"的原地颤动视频：

视频1

视频2

视频3

视频4

视频5

从这些“黑胶虫"污染视频中，我们可以总结出黑胶虫形态特征：

几乎都呈黑色椭圆点，有大有小；游离于细胞外，颤颤巍巍，仔细观察，能发现它在原地颤动。

此外，我们在帮客户分析细胞污染中，也发现俗说的“黑胶虫"污染真是“别有洞天"。下面是我们的沟通分析截图：

图3 客户沟通截图中的细胞图片

把这个图片放大如下：

图4 图中红圈中的黑点极有可能为支原体集落

接下来为了进一步确认，又让客户发了视频：

图5 客户沟通截图中的细胞视频

咱们把视频放大观察：

视频6

通过视频我们可以看出很多椭圆形的小黑点在原地颤动。先前，问过客户是否做过支原体检测，客户说做过，确定是支原体污染。在与客户的单独对话框里，我又进一步和客户确认了是否是支原体污染，截图如下：

图7 和客户的沟通截图

通过这个案例分析，我们推测，大家所俗称的原地颤动的“黑胶虫"污染极有可能是支原体污染，而这些颤颤巍巍的小圆点极有可能是支原体集落。未来，我们会收集大量的这种原地颤动的小黑点样本，做测序鉴定，进一步用大数据证实咱们的推测，把这些有意思的结果分享给大家。

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本期讲解就到这里了，如有细胞培养问题，欢迎微信公众号“AG8亚国服务生物"后台留言。

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