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三生有幸,舶来品韶华流光里,俯仰皆是Absin

更新时间:2024-04-18      点击次数:282

随着AG8亚国服务的发展与完善,我们的产品受到越来越多的老师信赖,今天带大家解读一篇满眼都是AG8亚国服务的文章。


文献信息


题目:Regulation of the migration of colorectal cancer stem cells via the TLR4/MyD88 signaling pathway by the novel surface marker CD14 following LPS stimulation

杂志:Oncology Letters 27.2 (2024): 60.

作者:Li Y, Shi J, Liu Z, et al


三生有幸,舶来品韶华流光里,俯仰皆是Absin

图 文献引用产品信息


研究背景


结直肠癌(CRC)是全球癌症相关死亡的主要原因之一,主要原因与CRC干细胞(CCSCs)引起的术后癌症复发、转移或癌细胞耐药有关,CCSCs缺乏一致和可靠的标记物限制了它们在临床实践中的使用。为了启动促炎反应,脂多糖(LPS)和CD14(单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的一种特殊表面标志物)通过Toll样受体4(TLR4)信号通路相互作用,此外,脂多糖通过TLR4信号通路促进结直肠癌的发展和转移,CD14与肿瘤的复发、生长、转移和治疗耐药有关,这与CSC的特征(如复发、生长、转移和耐药)是一致的,这表明CD14可能与CCSCs相关。


研究方法


本研究采用免疫荧光双标记法检测CD133和CD14,定量评估结直肠癌组织和癌旁组织石蜡包埋切片CCSCs中CD14的表达。随后,从结直肠癌组织中提取CD14+细胞,通过分析增殖、肿瘤亲和性和治疗耐药性来检测其干性特征,以证实表型鉴定。此外,迁移的体外检测能够检测CD14的功能。


研究结果


1、癌旁组织相比,所有结直肠癌组织中CD14和CD133共表达的阳性率均显著升高。


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图 CD14在CD133标记的结直肠csc中表达


2、EdU和CCK-8检测结果显示结肠癌CD14+细胞表现出强的增殖能力


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图 结肠癌CD14+细胞表现出增强的增殖能力

(CCK-8购自AG8亚国服务abs50003 CCK-8试剂盒)


3、细胞克隆实验表明,与CD14-细胞相比,CD14+细胞更大,核分裂增加,聚集成簇。用裸鼠异种移植实验表明植入45天后,CD14+细胞组的肿瘤明显大于CD14-细胞组


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图 CD14+细胞在结肠癌中具有致瘤性


4、耐药性分析。CD14+组和CD14-组细胞的IC50分别为2.554和17.02mg/L表明与阴性组相比,阳性组的耐药性增加


三生有幸,舶来品韶华流光里,俯仰皆是Absin

图 CCK-8测定5-FU对CD14+和CD14-细胞48h的IC50效应曲线


5、Transwell实验结果显示,与对照组相比,内毒素组表现出更强的迁移能力,而内毒素+中和抗体组的迁移能力比对照组更强(图A)。创面愈合实验表明,内毒素组的细胞迁移能力明显高于内毒素+中和抗体组(图B)。RT-qPCR结果显示MyD88基因表达水平以内毒素组最高(图C),Western blotting显示TLR4和MyD88蛋白的表达在内毒素+中和抗体组和内毒素组均显著高于对照组,其中内毒素组的增加更明显(图D)。

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三生有幸,舶来品韶华流光里,俯仰皆是Absin

图 内毒素影响细胞迁移

(RIPA裂解液abs9229、彩色PAGE快速凝胶试剂盒(10%)abs9367、ECL化学发光检测试剂盒abs920、 TLR4抗体abs132000、MyD88抗体abs135682、LPSabs47014848, 细胞快速RNA提取试剂盒 abs60027)

常规裂解液对比


品名

RIPA裂解液(弱)

RIPA裂解液(中)

RIPA裂解液(强)

货号-规格

abs9230-100mL

abs9228-100mL

abs9229-100mL

成分表

50mM Tris-HC(pH7.4)

50mM Tris-HC(pH7.4)

50mM Tris-HC(pH7.4)

150mM NaCl

150mM NaCl

150mM NaCl

1%NP-40

1%NP-40

1%Triton X-100

0.25% 脱氧胆酸钠

0.5% 脱氧胆酸钠

1% 脱氧胆酸钠


0.1% SDS

0.1% SDS

以及正钒酸钠,氟化钠,EDTA和抑肽酶等多种抑制剂

以及正钒酸钠,氟化钠,EDTA和抑肽酶等多种抑制剂

以及正钒酸钠,氟化钠,EDTA和抑肽酶等多种抑制剂

特点

不含高浓度去垢剂

有较高浓度的去垢剂,不适合用Bradford法来测定总蛋白浓度

有较高浓度的去垢剂,不适合用Bradford法来测定总蛋白浓度

裂解强度

温和

膜蛋白

一般

较好

很好

胞浆蛋白

很好

很好

很好

核蛋白

较好

较好

很好

应用推荐

WB,IP,Co-IP

WB,IP

WB,IP,Co-IP





本期好物推荐


类别

货号

产品名称

规格

样本处理

abs9346

细胞浆、细胞核及细胞膜蛋白抽提试剂盒

50T

abs9116

免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

100mL

abs9162

广谱型磷酸酶抑制剂混合物(100×储液)

1mL

abs9161

广谱型蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA,100×DMSO储液)

1mL

蛋白定量

abs9232

BCA蛋白定量试剂盒

500T

配胶试剂盒、Glass gel预制胶、Plastic gel预制胶、abs93系列预制胶

上样与电泳

abs953

上样缓冲液(2×)

10mL

abs9829

上样缓冲液(5×)

10mL

abs951

电泳液(10×)

100mL

abs923

预染蛋白Marker(10-245kDa)

500uL

转膜

abs932

PVDF膜(0.45μm)

20张

abs960

NC膜(0.45μm)

20张

abs950

电转液(10×)

100mL

封闭

abs9175

脱脂奶粉

500g

abs9157

牛血清白蛋白

100g

抗体稀释与去除

abs954

WB专用一抗二抗稀释液

100mL

abs967

Western一抗二抗去除液(强碱性)

500mL

显色与检测

abs920

ECL化学发光检测试剂盒

25mL×2






Absin产品线:
爆款产品:试剂盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化检测、残留检测、多因子检测);细胞培养(类器官试剂盒+基质胶,胎牛血清+培养添加剂+细胞因子)、分化试剂盒;分子(mRNA合成服务+提取试剂盒);化合物大包装;辅助试剂、耗材/仪器、定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
特色产品:鸡胚提取物CEE、B27、N2、霍乱毒素B亚单位CTB、牛脑垂体提取物BPE、百日咳毒素PTX、重组人胰岛素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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