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生化检测│肾功能、肝功能、血糖、血脂检测临床意义及科学研究应用分享

更新时间:2024-05-23      点击次数:270

一、背景介绍


1、肾功能检测指标及临床意义


肌酐 abs580199-96T

临床意义:血清肌酐浓度升高见于急慢性肾小球肾炎、急性或慢性肾功能不全等。血清肌酐浓度与肌肉量成比例,故肢端肥大症巨人症时,血清肌酊酐浓度升高;相反,肌肉萎suo性疾病时血清肌酐浓度可降低。透析治疗前后血清肌酐测定可用于选择透析指标,判断透析治疗效果。


尿素氮(BUN) abs580197-96T

临床意义:尿素氮是机体蛋白质的代谢终末产物,是一项检测肾小球的滤过功能的指标,一般在肾功能不全的失代偿期时或氮质血症时,血尿素氮会明显升高。进行该项指标的测定,主要用于诊断器质性肾功能损害,例如各种原发性和继发性肾小球肾炎、多囊肾、肾肿瘤等,还可以作为肾衰竭时透析的评估指标。


尿酸 abs580057-96T

临床意义:尿酸是嘌呤代谢的终末产物,人类大部分来自鸟嘌呤,主要是经肾小球滤过随尿排出,肾功能减退时血清尿酸增高。尿酸可由肾小球滤过和肾小管排泌,但大部分被肾小管重吸收,最后仅排出滤过量的8%。尿酸增高:严重肾衰竭时可有部分尿酸从肾小管排泌,慢性尿毒症时血清尿酸的增高程度不明显。各种原因所致尿酸生成异常增多,如原发性或继发性痛风者,血清尿酸可显著增高。尿酸降低常见于恶性贫血、乳糜泻及肾上腺皮质激素等药物治疗后。


2、肝功能检测指标及临床意义


谷丙转氨酶(ALT) abs580002-96T

临床意义:人体中很多脏器都含有ALT,其分布大致为肝>肾>心>肌肉。肝内ALT活性远远超过其它脏器的活性,主要存在于肝细胞质的可溶性部分,故测定ALT反映肝脏损害具有特殊意义。血清ALT活性增高原因:急性病毒性肝炎;骨骼肌、肾脏及胰腺等组织坏死;伴有急性肝炎的传染性单核细胞增多症;严重心肌梗塞、心力衰竭时的肝郁血;胆道疾病、肝外癌性胆道梗阻性黄疸(如胆管癌、胰头癌)、胆石症、胆管炎及胆囊炎;应用锑剂、奎林、呋喃西林、利福平、某些避孕药、苯巴妥等药物,以及酒精、铅、汞、四氯化碳等中毒;外科手术、麻醉、剧烈运动、早期妊娠等。


谷草转氨酶(AST) abs580004-96T

临床意义:临床AST测定主要用于诊断急性心肌梗塞(AMI)、肝细胞及骨骼肌疾病。AMI发作后6-8h开始升高,24h达高峰,约3-5天恢复正常。升高还见于肺栓塞,充血性心力衰竭,病毒性肝炎,中毒性肝炎,肝硬化,肝癌(早期正常),胆道阻塞,溶血性疾病、骨骼肌疾病如进行性肌营养不良、皮肌炎(神经性肌炎正常)、挤压性肌肉损伤,坏疽,急性胰腺炎等。肝炎发病早期,由于肝AST含量高,往往血清AST/ALT>1,但由于ALT清除较慢,所以不久ALT>AST。恢复期一般也是ALT恢复较慢。ALT和AST持续升高,往往是慢性肝炎的指标。


不同类型的肝炎患者AST/ALT比值


肝脏疾病

血液AST来源形式

AST/ALT比值

急性肝炎和轻度慢性肝炎

肝细胞线粒体完整,AST主要从肝细胞胞浆内释放

<1

重症肝炎、中度和重度慢性肝炎

肝细胞线粒体遭到严重破坏,AST从线粒体和胞浆内释放

≈1

肝硬化和肝癌患者

肝细胞的破坏程度更加严重,线粒体也受到严重的破坏

>1,甚至>2





胆红素  abs580147-96T

临床意义:总胆红素是直接胆红素和间接胆红素的总和。血清总胆红素的测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目血清直接胆红素的升高,说明经肝细胞处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。直接胆红素的测定有助于黄疸类型的诊断和鉴别诊断。直接胆红素增高:主要见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸、肝癌、胰头癌、胆石症、胆管癌等。间接胆红素主要是由红细胞破坏而来,未在肝内经过葡萄糖醛酸化。间接胆红素经过肝脏代谢又可变为直接胆红素,随胆汁排入胆道,最后经大便排出。一般情况下间接胆红素偏高往往预示着肝脏的病变。


白蛋白  abs580137-96T & abs580138-96T

临床意义:白蛋白升高偶见于脱水所致的血液浓缩。白蛋白降低与总蛋白原因大致相同。急性降低见于大量出血与严重烧伤。慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功能受损、腹水形成、肠道肿瘤与结核慢性失血、营养不良和消耗性疾病等。白蛋白如低于20g/L,临床可出现水肿。


3、血糖检测指标及临床意义


葡萄糖 abs580025-96T

临床意义:空腹血糖升高/降低分为生理性增高和病理性增高。生理性血糖升高:多见于饱食或高糖饮食及剧烈运动后或情绪紧张等。

病理性升高:

a.糖尿病;

b.其它内分泌疾病如甲亢、巨人症或肢端肥大症、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤等;

c.肝硬化病人。生理性低血糖多见于饥饿和剧烈运动。

病理性低血糖:

a.对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减少;

b.严重肝病患者,由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。


4、血脂检测指标及临床意义


甘油三酯(TG) abs580085-96T

临床意义:现在认为甘油三酯也是冠心病发病的一个危险因素,当其升高时,也应该给予饮食控制或药物治疗。其升高可见于各种高脂蛋白血症、糖尿病、痛风、梗阻、黄疸、甲状腺功能低下、胰腺炎等。降低:见于低脂蛋白血症、营养吸收不良、甲状腺功能亢进、甲状旁腺功能亢进,还可见于过度饥饿、运动等。


总胆固醇(TC)  abs580114-96T

临床意义:胆固醇升高容易引起动脉粥样硬化性心、脑血管疾病如冠心病、心肌梗死,脑卒中等。但如果作为一个诊断指标来说,它既不够特异,也不够敏感,所以不能作为诊断指标,只能作为评价动脉粥样硬化的危险因素,而常用做动脉粥样硬化的预防、发病估计、治疗观察等的参考指标。胆固醇升高:可见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等时。此外,吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也都可使血液胆固醇升高。妊娠末三个月时,可能明显升高,产后恢复原有水平。胆固醇降低:可见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性肿瘤、营养吸收不良、巨细胞性贫血等。此外,女性月经期也可降低。


低密度脂蛋白 abs580113-96T

临床意义:低密度脂蛋白(LDL)升高可见于家族性高胆固醇血症、家族性apoB缺陷症、混合性高脂血症、糖尿病、甲状腺机能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾功能衰竭、妊娠、多发性肌瘤、某些药物的使用等。遗传性高脂蛋白血症、甲状腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾功能衰竭、Cushing综合征等。LDL升高是发生动脉粥样硬化的重要危险因素之一,用于判断是否存在患冠心病的危险性,也是血脂异常防治的首要指标。低密度脂蛋白降低:可见于家族性无β和低β-脂蛋白血症、营养不良、甲状腺机能亢进、消化吸收不良、肝硬化、慢性消耗疾病、恶性肿瘤、apoB合成减少等。


高密度脂蛋白 abs580112-96T

临床意义:高密度脂蛋白(HDL)主要功能是将胆固醇从周围组织细胞转运到肝脏,代谢及排泄过多的胆固醇,以维持血浆正常胆固醇水平。其被誉为抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子。所以HDL水平低的个体患冠心病的危险性增加,其水平高者患冠心病的可能性小。降低:见于急、慢性肝病、急性应激反应(心肌梗塞、外科手术、损伤)、糖尿病、甲状腺功能亢进或减低、慢性贫血等。

注:来源搜狐,侵删!


二、常规肾、肝功能检测在科学研究中的应用案例


2023年6月17日,上海市第一妇婴保健院生殖免疫科周倩主任医生、中国科学院重庆绿色智能技术研究院于永生副研究员联合重庆大学生物工程学院生物流变学教育部重点实验室冯茜副教授团队,在Acta Biomaterialia杂志上发表了题为“Functionalized human umbilical cord mesenchymal stem cells andinjectable HA/Gel hydrogel synergy in endometrial repair and fertility recovery"的研究论文。他们的研究表明,负载 hUCMSCs 的可注射水凝胶具有作为促进子宫内膜损伤快速恢复的有效治疗策略的潜力,并且这种水凝胶是再生医学应用的有前途的生物材料。


生化检测│肾功能、肝功能、血糖、血脂检测临床意义及科学研究应用分享

图1 功能化人脐带间充质干细胞与可注射HA/Gel水凝胶在子宫内膜修复和生育能力恢复中的协同作用概述


研究亮点:

a.氧化透明质酸(HA-CHO)/酰肼接枝明胶(Gel-ADH)水凝胶联合人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)可有效改善子宫内膜损伤大鼠模型的子宫内膜再生;

b.hUCMSCs负载水凝胶治疗通过MEK/ERK1/2信号通路促进子宫内膜VEGF的表达,调节炎症因子的平衡;

c.子宫内膜损伤大鼠模型胚胎着床率和活产率均恢复至正常水平,且水凝胶治疗后对母鼠、胎儿及子代发育无不良影响。


生化检测│肾功能、肝功能、血糖、血脂检测临床意义及科学研究应用分享

图2  母鼠血清肌酐(abs580199-96T)、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量检测评估肾和肝功能损伤情况


接下来,小爱就以肾功能检查指标肌酐检测试剂盒为例,给大家详细介绍使用方法。


肌酐检测试剂盒使用方法介绍


一、试剂盒组分


组分

规格

储存条件

96-Well Microplate

1 plate

Reaction Buffer

20mL×1

4℃

Enzyme

Powder×1

-20℃,避光保存

Dye Reagent

Powder×1

-20℃,避光保存

Standard

Powder×1

4℃

Plate Adhesive Strips

3 Strips

Technical Manual

1 Manual





二、操作步骤:


1、材料和试剂准备

自备材料:酶标仪(可在546nm处读取吸光值)、蒸馏水、移液器与枪头、研钵、离心机、计时器等。

Enzyme:使用前加入9 mL Reaction Buffer 充分溶解。

Dye Reagent:使用前加入10 mL Reaction Buffer充分溶解。

Standard:使用前加入1mL蒸馏水溶解,然后取50 μL加入到950 μL蒸馏水中,获得浓度为5 mmol/L的标准品溶液。


2、样本处理

尿液、血清或血浆样本:直接检测。


3、上样及检测

使用前将所有试剂加热至室温,然后按照如下表格加样。



试剂

标准品孔

对照孔

样品孔

Standard

10μL

-

-

Distilled water

-

10μL

-

Sample

-

-

10μL

Enzyme

90μL

90μL

90μL

Dye Reagent

100μL

100μL

100μL

混合均匀,放入37℃恒温箱中孵育15min后,在546nm处测定吸光值。





注:a.对于标准品,可进行2倍连续稀释,制成标准曲线;

      b.对于未知的样品,我们建议挑选几个样品进行预实验,以确定样品浓度和稀释倍数。


4、标准曲线

标准曲线仅用于参考,每次实验都必须做一条新的标准曲线。


生化检测│肾功能、肝功能、血糖、血脂检测临床意义及科学研究应用分享

检测范围:0.05mmol/L-5mmol/L

温馨提示:本公司提供的试剂盒仅作科学研究使用,不支持临床检测。

常见问题解答


Q1:试剂盒中的96-Well Microplate只有一个,不够实验使用怎么办?

A1:该试剂盒中的96孔板是免费送的,后续实验可以用常规的96孔酶标板代替。


Q2:试剂盒操作说明书中既有标准曲线法又有公式法,我应该选择哪种计算方式?

A2:两种方式任选一种就可以,公式是简便算法,建议按照标曲计算,会更加准确。需要注意的是,使用标准曲线法,每次实验必须重新绘制标准曲线。


Q3:试剂盒一次用不完,最长能保存多久?

A3:试剂盒中染料(Dye)溶解后易氧化变质,需要现配现用,不建议储存。长期储存可能影响显色读数进而影响检测;如果样本需要分批检测,建议分批收样储存,待样本收齐后统一检测。此外,如因储存时间过久或其他人为原因导致组分不够使用,可与我司联系单独购买试剂盒组分。



参考文献


[1] 杨柳易,王琛.有氧糖酵解对肾脏疾病影响的研究进展[J].中国中西医结合肾病杂志, 2022,23(8):744-746.

[2] Chang L, Li G, Jiang S, et al. 1-Pyrroline-5-carboxylate inhibit T cell glycolysis in prostate cancer microenvironment by SHP1/PKM2/LDHB axis[J]. Cell Commun Signal. 2024;22(1):101. Published 2024 Feb 8. doi:10.1186/s12964-024-01493-1

常规生化功能检查试剂盒推荐:


检测项目

货号

产品名称

规格

检测范围

肝功能

abs580002

谷丙转氨酶 (ALT)检测试剂盒

96T

0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

abs580004

谷草转氨酶 (AST)检测试剂盒

96T

0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

abs580137

白蛋白(BCG)检测试剂盒

96T

1 mg/mL - 100 mg/mL

abs580138

白蛋白(BCP)检测试剂盒

96T

0.5 mg/mL - 50 mg/mL

abs580147

胆红素检测试剂盒

96T

1 μmol/L - 200 μmol/L

肾功能

abs580057

尿酸检测试剂盒

96T

0.04 mmol/L - 4 mmol/L

abs580197

尿素氮(BUN)检测试剂盒

96T

0.05 mmol/L - 1 mmol/L

abs580199

肌酐检测试剂盒

96T

0.02 mmol/L - 2 mmol/L

血糖

abs580025

葡萄糖检测试剂盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L

血脂

abs580085

甘油三酯(TG)检测试剂盒

96T

4 μmol/L - 400 μmol/L

abs580114

总胆固醇(TC)检测试剂盒

96T

0.05 mmol/L - 5 mmol/L

abs580113

低密度脂蛋白检测试剂盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L

abs580112

高密度脂蛋白检测试剂盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L






Absin产品线:
爆款产品:试剂盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化检测、残留检测、多因子检测);细胞培养(类器官试剂盒+基质胶,胎牛血清+培养添加剂+细胞因子)、分化试剂盒;分子(mRNA合成服务+提取试剂盒);化合物大包装;辅助试剂、耗材/仪器、定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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