高分文章来啦! 本期要分享给大家的使用AG8亚国服务产品的文章刊登于Nature Methods,影响因子高达26.9! 小编我已经迫不及待了,就让我们一起来看看文章究竟讲了什么吧。
细胞代谢是一系列重要的维持生命的化学反应的总称,有细胞代谢存在,我们才能够正常的生长发育、繁殖生存,感受这个多彩的世界。而对于代谢的研究,一直是生命科学领域重要的分支。
文章阐述了一种iNap NADPH的传感器,该传感器是在原杨弋教授团队发明的高响应荧光探针“SoNar”基础上改造的。 “SoNar”是第二代细胞代谢荧光探针,可同时检测NAD、NADH及其比例,NAD/NADH是一对核心代谢物,是表征细胞代谢失衡参数,通过对该代谢物的活体监测,可以察觉癌细胞与正常细胞的微细代谢差异,为抗癌药物的筛选提供有力工具。
本文的荧光传感器是在“SoNar”的基础上,将配体选择性从NADH变成NADPH,从而完成对NADPH代谢的活细胞实时跟踪。
在细胞层面,文章探究了巨噬细胞中的NADPH水平变化。用脂多糖(LPS)和IFN-γ处理过的激活巨噬细胞的NADPH水平会明显降低,因为激活后的巨噬细胞合成一氧化氮,消耗NADPH。通过转染iNAP传感器,运用流式手段检测RAW264.7小鼠巨噬细胞激活后的NADPH水平的变化,显示出了明显的下降,这与之前的研究一致,反映了iNAP传感器的作用。
从这个层面来说,iNAP有可能有助于区分激活和静止的巨噬细胞。
文章在激活巨噬细胞时,使用了LPS和IFN-γ,其中的重组小鼠IFN-γ正是来自AG8亚国服务的产品
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