293细胞是人肾上皮细胞系,包含多种衍生细胞株如AAV293、HEK293、293T、 293F、293A等。由于293细胞以下特点:①.293细胞比较容易转染;②拥有人类所有的翻译后修饰,能够产生与人类自然合成的蛋白质最相似的蛋白质;③.293细胞是用于制药生产的大规模培养的理想宿主细胞;④.具有高生长速率、摇瓶中细胞密度高、高效灵活的代谢和遗传操作等优点,是生物治疗药物生产的可行工具;⑤是一种敏感的人类胚胎细胞,具有与早期分化神经元相似的特征,在体外更容易受到环境因素的影响,通常被用作新药发现和毒性测试的模型,293细胞被广泛用于重组治疗蛋白、疫苗、抗癌剂和其他临床相关药物的生产研究,因此获得“工具细胞"、“21世纪最有前途的细胞"等称号。
图1 293细胞形态
表1 293细胞基本信息
细胞名称 | 293细胞 |
种属 | 人 |
组织来源 | 胚肾 |
形态特点 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
传代周期 | 2-3天 |
培养体系及条件 | DMEM(abs9483)+10%FBS(abs972);气相:95%空气+5%CO₂;温度:37℃ |
冻存条件 | 95%培养基+5%DMSO(abs9187)冻存于液氮 |
AG8亚国服务最新推出的RF 293细胞DNA转染试剂可专用于293细胞的质粒DNA转染,转染阳性率可高达95%以上。特别地,RF 293细胞DNA转染试剂盒拥有极低的细胞毒性,转染细胞24小时后,细胞死亡率仅为5%左右。同时该试剂盒操作十分简便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中即可,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液。
货号 | 产品名称 | 试剂盒组成 | 规格 |
abs60369 | RF 293细胞DNA转染试剂盒 | RF 293、Trans buffer | 0.5/1.5mL |
细胞转染性能: 可高效转染293细胞,包括AAV293 、HEK293、293T、293F、293A,转染效率可高达95%。
极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率在5%左右,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观。
操作简便:可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。
图2 RF 293细胞DNA转染试剂转染pEGFP-C2质粒到AAV-293细胞,绿色荧光蛋白的表达情况
1、转染前的细胞汇合度以60-70%为宜,转染时细胞生长状态应保持良好,不要有支原体污染。
2、转染,建议进行优化实验,如24孔培养板,每孔质粒用量0.8 ug,转染试剂用量可选择2.0 ul、2.5 ul、3.0 ul进行优化。
3、应避免转染复合物制备体系中存在血清,因血清会干扰RF 293质粒与DNA形成复合物,培养基中尽量不要使用抗生素。
4、对于24孔板,转染前一天接种的细胞量以1.5-2.5X105个/孔为宜,建议研究者进行适当的优化。
货号 | 产品名称 | 规格 |
abs47047834 | 胰酶 | 100g/500g |
abs961 | 10×PBS缓冲液 | 500ml/500ml×10 |
abs9483 | 高糖 DMEM 培养基(含 L-谷氨酰胺和丙酮酸钠) | 500ml/500ml×10 |
abs972 | 胎牛血清(优级) | 125ml/500ml |
abs9187 | 二甲基亚砜(DMSO)(细胞培养级) | 50mL |
abs7004 | 细胞培养皿(35mm) | 500个/箱 |
abs7005 | 细胞培养皿(60mm) | 500个/箱 |
abs7003 | 细胞培养皿(100mm) | 500个/箱 |
abs7033 | 标准透明6孔细胞培养板 | 50个/盒 |
abs7034 | 标准透明12孔细胞培养板 | 50个/箱 |
abs7035 | 标准透明24孔细胞培养板 | 50个/盒 |
abs7040 | 标准透明48孔细胞培养板 | 50个/箱 |
abs7036 | 标准透明96孔细胞培养板 | 50个/盒 |
abs7119 | 1.5ml离心管(无菌无酶) | 500支/盒,10盒/箱 (1袋/盒) |
Absin特色产品线:
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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