技术讲座 | 多重荧光免疫组化在肿瘤免疫治疗中的应用

技术原理：

多重荧光免疫组化（mIHC），主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大（Tyramide signal amplification）是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。

TSA主要原理是利用酪胺 Tyramide 的过氧化物酶反应（酪胺盐在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点），产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基（包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基）结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积，与随后加入的 Streptavidin—HRP/荧光基团结合，经几次这样的循环放大，可以结合大量的酶分子or荧光基团，结果使其检测信号得到几何级放大。

TSA多重荧光免疫组化染色示意图

简单来说，用这种方法做多重荧光染色是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。该荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后进行微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，最后去检测结果。

讲座主题：

多重荧光免疫组化在肿瘤免疫治疗中的应用

讲座时间：

6月29日（本周四）下午15:00-16:00

讲座内容：

1、多重荧光免疫组化技术简介；

2、多重荧光免疫组化在肿瘤靶向治疗中的应用；

3、文献案例解析；

4、Absin多重荧光免疫组化解决方案。

报名方式：

详见微信公众号“AG8亚国服务生物"