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大咖来袭!多靶点组织多色与空间表型微环境解析

更新时间:2023-11-28      点击次数:1030

多重免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积,与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合,经几次这样的循环放大,可以结合大量的酶分子or荧光基团,结果使其检测信号得到几何级放大。



简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。
然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,最后去检测结果。

讲座主题:大咖来袭!多靶点组织多色与空间表型微环境解析


讲座时间:12月5日(周二)15:00-16:00


讲座内容:

1.多靶点组织多色与原位分析的技术原理与进展

2.多维度解析组织实验设计与分析技巧

3.组织空间大数据信息分析方法与案例分享


特邀嘉宾:

李光超 博士  TissueGnostics (TG) 公司

中国科学院动物研究所毕业,具有多年显微成像及病理学分析领域工作经验,发表多篇SCI科研论文。着手打造专业的全景组织流式定量分析平

台,在肿瘤免疫微环境、精准医疗和个体化治疗等领域具有丰富经验。

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