Mouse IL-4 ELISA Kit

检测原理：

Mouse IL-4 ELISA Kit 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 IL-4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的IL-4与固相抗体和检测抗体结合，形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物，避光显色。加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

Mouse IL-4 ELISA Kit  预包被96孔板、标准品、抗小鼠 IL-4检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：2.3 pg/mL

检测范围：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范围：75-112%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

白细胞介素 4（IL-4） ， 又称为 B 细胞刺激因子 1, 是一个约为 18-20 kDa 的单体细胞因子， 在免疫反应中呈多向性效应。 小鼠 IL-4 的前体有 140 个氨基酸， 包括一个 20 个氨基酸的信号肽和一个 120 氨基酸的成熟链。 IL-4 含有 3 个 N 链接糖基化潜在位点， 3 个链内二硫键， 其结构为一个捆绑的四α-螺旋体。 与人 IL-4 相似，小鼠 IL-4 有一个小的选择性剪切体。 与人 IL-4 不同的是， 此剪切体被认为表达很低，意义不大。 成熟的小鼠 IL-4 氨基酸序列与人和大鼠 IL-4 分别有 43%和 63%同源性。 研究显示， 人、 小鼠和大鼠 IL-4 的活性均属于种属特异性。 IL-4 由趋向 Th2的 CD4+ T 细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞、 NK T 细胞、γδT 细胞和嗜酸性细胞表达。

IL-4 在 2 型免疫反应中起关键作用， 能促进 Th2 分化和 B 细胞分泌免疫球蛋白 G1和免疫球蛋白 E 亚型。 IL-4 通过结合 I 型或 II 型受体复合物引起 Th2 分化， 该复合物含有分别与γ链或 IL13Rα1 偶联 IL-4 受体α亚基。 通过细胞表面 IL-4 受体的异二聚体化， 激活 JAK 族蛋白络氨酸激酶， 引起其细胞质内 C 端磷酸化。 从而引发 STAT6 的招募和磷酸化。 随着 STAT6 的磷酸化、 构象发生变化， 导致 STAT6的二聚体化、 核转位、 与靶基因 DNA 结合和转录激活， 这些靶基因包括 IL-4、 IL-5、IL-13 以及 Th2 特异性因子 GATA3 和 c-Maf 等。在功能上， IL-4 促进小鼠 B 细胞增殖、 生存和免疫球蛋白类转换为 IgG1和 IgE， 促进肥大细胞、 嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的启动和趋化， 促进幼稚 CD4+ 细胞获得Th2 表型， 以及促进上皮细胞的增殖和活化。 在肿瘤免疫学方面， IL-4 也是一个重要细胞因子。 在早期小鼠实验中， 研究人员发现 IL-4 具有强大的抗肿瘤能力。 小鼠排斥表达 IL-4 的肿瘤， 形成长期的抗肿瘤免疫。 这可能是由于 IL-4 具有抗血管生成作用或激活、 选择 CD8+ T 细胞的能力。 不可理喻的是， 新的证据显示 IL-4是一个促肿瘤分子， 因此 IL-4 是一个具有反向作用的细胞因子。 可能的解释是，IL-4 诱导肿瘤细胞中的抵抗凋亡分子上调， 和 CD8+ T 细胞中的溶细胞分子下调。 另外，肿瘤产生的 IL-4 也被认为可作用于局部肿瘤相关巨噬细胞（TAMs） ， 从而诱导促进细胞迁移的组织蛋白酶的分泌。