简要描述:无DMSO无血清细胞冻存液的有效成分是单一的两性高分子氨基酸衍生物,不含任何其他冷冻保护成分,不含DMSO、不含任何人源或动物源成分。用于原代肝细胞,神经细胞冻存细胞。
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细胞生物学
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无DMSO无血清细胞冻存液的有效成分是单一的两性高分子氨基酸衍生物,不含任何其他冷冻保护成分,不含DMSO、不含任何人源或动物源成分。用于原代肝细胞,神经细胞冻存细胞。产品特色:无DMSO,无血清,无蛋白,安全性更高。即取即用,无需配制。无需程序降温,一步实现细胞冻存。
准备细胞:1、检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染。2、冻存前的细胞处于对数生长期最佳。3、计数待冻存的细胞数量。悬浮细胞应 180g 离心 5~10min 后除去培养基,贴壁细胞应消化后计数,再 180g 离心除去培养基以获得细胞沉淀。细胞冻存:1、首先确定细胞适宜的冻存密度和体积,计算应使用的本冻存液体积。注意:可使用的冻存密度为 2~40×106 /ml,最佳密度为 4~20×106 /ml。冻存体积为 0.25~1ml/管,推荐冻存体积为 0.5ml/管。2、吸取适量 冻存液 重悬细胞,立即分装至细胞冻存管。3、立即将冻存管移入-80℃低温冰箱,不能采取任何程序降温措施或使用程序降温装置。如果无法立即移入-80℃低温冰箱,至少应当先移入 0℃以下环境中(如-20℃冰箱)短暂存放 10 min 左右,同样不能采取程序降温。冻存液重悬后的细胞不能在室温或 2~8℃静置超过 10 min 以上。4、-80℃冰箱过夜后的冻存管,要立即移入液氮中储存,不可于-80℃长期冻存。细胞复苏:1、先准备室温或 37℃预温的基础培养基,其体积为冻存液体积的 15~30 倍。2、取出液氮中的冻存管,置于 37℃水浴并不断轻摇。待剩余 1 粒米大小的冰块时,迅速移出水浴。3、立即用基础培养基稀释细胞悬液,轻柔吹打 3~5 次混匀。然后,180g 离心 5~10 分钟,获得细胞沉淀备用。4、加入适量新鲜培养基,使用移液管缓慢悬浮细胞,并将细胞转染细胞培养皿/瓶中,显微镜下观察细胞状态,放入细胞培养箱中培养。5、24h 后观察细胞状态,并更换新鲜细胞培养液。
2-8℃,有效期12个月。
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