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品牌 | absin | CAS | - |
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分子式 | - | 纯度 | - |
分子量 | - | 货号 | abs9223 |
规格 | 500ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | - | 应用领域 | 化工,生物产业 |
产品描述:
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
使用方法:
1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm;
2、组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min;
3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min;
4、组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次,直至终点;
5、用蒸馏水冲洗数次;
6、常规脱水、包埋。
注意事项:
1、厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3、防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6、每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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