细胞裂解是改变细胞通透性和活性的重要实验方法。主要分为化学法和机械法，前者比较温和，后者虽然产量高，但反应更剧烈，很有可能造成细胞中的DNA断裂。这两种方法(包括SDS和溶菌酶处理等)提取纯化DNA中常用的方法。机械裂解可以更均一的裂解细胞，同化学裂解相比，机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性。机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞，但也会造成DNA的断裂。一、机械裂解法主要有以下两种：1.热休克，既反复冻溶法，是一种常用的机械裂解方式比，通常由冷冻和解冻两部分组成。原理：由...

CHIR99021（CHIR99021，CHIR99021）是氨基嘧啶衍生物，是一种高效的GSK-3α（IC50：10nm）和GSK-3β（IC50：6.7nm）抑制剂，CHIR-99021对GSK-3的选择性比接近的同源物CDC2、ERK2以及其他蛋白激酶高500倍以上。CHIR-99021激活Wnt/β-catenin信号通路，诱导胚胎干细胞的心肌向分化。CHIR99021的实验参考方法介绍：一、激酶测定通过使用其His或Glu标签从SF9细胞中纯化激酶。纯化Glu标记的...

生长因子是具有刺激细胞生长活性的细胞因子。一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。存在于血小板和各种成体与胚胎组织及大多数培养细胞中，对不同种类细胞具有一定的专一性。通常培养细胞的生长需要多种生长因子顺序的协调作用，肿瘤细胞具有不依赖生长因子的自主性生长的特点。生长因子广泛用于中性粒细胞减少症、白血病和再生障碍性贫血等疾病的治疗。生长因子指在组织培养中，除了氨基酸、维生素、葡萄糖以及无机盐等正常成分之外，其可以代替培养基血清高...

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时，将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉采血。和新生牛血清相比，胎牛血清显然产量...

牛垂体提取物（BPE）是由牛脑垂体制备的提取物，有研究表明BPE具有明显改善人垂体腺瘤细胞体外无血清培养条件的作用,对离体培养的垂体腺瘤细胞增殖具有促进作用。常用作无血清细胞培养的生长补充剂，可促进上皮细胞、内皮细胞和黑色素细胞增殖，广泛用作各种上皮细胞和黑色素细胞培养中的补充剂。此外，其具有抗氧化能力，可对抗过氧化氢诱导的细胞坏死，蛋白质氧化，膜破碎和DNA损伤。BPE是无血清的促有丝分裂添加剂，含有天然生长因子的混合物，可与MCDB系列（MCDB170或MSDB154）或...

Surfactin(表面活性素)由β-羟基脂肪酸与肽链以内酯键结合而成。多数细菌代谢产生的表面活性素的肽链为七元肽，即分子中的肽链由7个α-氨基酸组成，再与带有12~17个碳原子的β-羟基脂肪酸构成一个大内酯环，相对分子质量(Mr)为1000左右。表面活性素可通过溶解和破坏细胞膜发挥抗菌作用，其与膜中的极性头部和疏水酰基链均可相互作用，高浓度时引起磷脂双分子层高度不稳定，中等浓度时在细胞膜中形成离子传导孔与Ca2+结合，有助于膜渗透；其还可通过有机屏障驱动其他单价和二价阳离子...

细胞中如果污染细菌，最常见的有枯草杆菌等革兰阳性菌以及大肠杆菌、假单孢菌等革兰阴性菌，其中又以白色葡萄球菌较常见。培养细胞受细菌污染后，会很快出现培养液变混浊，pH改变。也有少数培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。所以，每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，最后变圆脱落死亡，造成实验失败和细胞株(系)丢失。细胞污染的来源无菌观念薄弱，穿戴不注意进细胞房不换鞋，不戴口罩，不戴手套，是细胞房的大忌讳！有更严格的细胞房连帽子都要戴上。为什么呢...

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是细胞培养中常用的添加培养基。它营养丰富，大约含有三四百种不同成分，具有基础培养基所不具备的营养因子。对于细胞培养而言，胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清给细胞提供的益处主要体...