WesternBlot（WB）即蛋白免疫印迹实验，是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小讲蛋白分离，再通过电场力将蛋白转移到杂交膜上。然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB是进行蛋白质分析zui流行和成熟的技术之一。在WB过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样，只是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个WB参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标...

鸡胚提取物它的K、Fe、Se矿物元素和维生素A、D、B2等含量也很高。这使得它不但具有补充这些营养素的作用，而且，还可能有一些保健功能。本试验用低硒饲料喂饲的小鼠4周后，各剂量组和低硒对照组动物全血GPX活性抑制率30%，试验至8周末，低硒组血硒降低，全血GPX活性抑制率仍30%。说明硒营养不良动物模型建立成功。而且，低硒组动物的血硒、GPX活性保持在较低水平，显示硒营养不良动物模型稳定。小鼠的脑、肝硒含量均降低(P0.05)，脑、肾、肝GPX也显着性降低(P0.05)，而全...

免疫学三大工具，IHC、Westernblot、ELISA，分别用于定位，定性和定量!IHC（免疫组化）是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和组织学技术（组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等），通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织（细胞）内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。ELISA（酶联免疫吸附试验）用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品...

使用牛垂体提取物工作人员应当首先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验.对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行（至少是ClassII）操作过程中,应避免引起aerosol的产生，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等等。定期检测下列项目，CO2钢瓶的CO2压力，CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染（水盘的水需用无菌水，每周定时更换）。无菌操作台内的airflow压力，定期更换紫外线灯管和...

血清小知识血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出...

Q：步骤上的可选步骤能否省略？A：该试剂盒是经过实验验证的，再进行验证实验的时候实验室都是要做这个可选步骤的，建议不要省略，按照说明书操作。Q：proteinA和proteinGbeads怎么选？A：各5ul就可以了Q：超声破碎冰上操作是必须的吗？4℃条件能否微调？A：建议冰上操作，4℃是可以微调的。Q：beads出现吸不出来的情况，怎么处理？A：吸之前需注意枪头要剪一下再吸，如若beads吸不上来，可加入等体积的20%乙醇混匀后再吸。Q：如果没有超声破碎仪的话，能不能用酶解...

1、血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；因此需要使用封闭剂进行封闭。常用试剂为血清和BSA等。封闭血清一般是和二抗同一来源的，但不能与一抗来源一致。2、一抗和二抗浓度和孵育时间：一抗孵育条件在免疫组化反应中zui重要，包括孵育时间和抗体浓度。一抗孵育温度有几种：4度、室温、37度，其中4度效果*；孵育时间与温度、抗体浓度有关，一般37度1-2h，4度过夜（从冰箱拿出后37度复温45min）。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30m...

标签抗体，别名为抗原表位，又称抗原决定簇，是抗原分子中决定抗原特异性的特殊区域或基团，是与抗体特异性结合的结构或序列。随着生物技术的发展，科研人员可以通过DNA重组技术，构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白，进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化，以达到研究的需求。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。1.Flag标签—抗Flag标签抗体Flag标签系统是利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白。Flag标签可位于蛋白质的C端或N端，该...