ECL化学发光检测试剂盒常见问题
更新时间:2019-10-30 点击次数:1972
AG8亚国服务热卖单品ECL化学发光检测试剂盒,灵敏度更高,背景更低,稳定性更好。常备现货, 小编整理了ECL 的常见问题,助您的实验更顺利! 问题 | 原因 | 方法 | 白色条带黑色背景 | 体系中HRP过量 | 进一步稀释HRP 标记 | 膜上有棕色或黄色条带 | 背景发亮 | 信号弱或无信号 | HRP过量,消耗底物 | 进一步稀释HRP 标记 | 抗原或抗体不足 | 增加抗体 | 使用超级ECL | 转膜失败 | 优化转膜条件 | HRP 活性低 | 测试HRP 活性:暗室中,将1ul未稀释的HRP 放入装有1-2ml的基质工作 溶液的试管中。 几分钟内,溶液会立即发出蓝光。 | 高背景 | HRP过量,消耗底物 | 进一步稀释HRP 标记 | 封闭不充分或使用了不适当的封闭试剂 | 优化转膜条件 | 洗涤不充分 | 增加洗涤时间和次数 | 膜过度曝光 | 减少曝光时间 | 抗原、抗体 过量 | 减少抗体上样量 | 抗体特异性差 | 优化抗体特异性 | 条带有斑点 | 转膜失败 | 优化转膜条件 | x射线胶片与膜之间有气泡 | 去除所有气泡后,再曝光到胶片上 | 背景有斑点 | 形成聚合体 | 使用前通过0.2um过滤器过滤hrp -偶联物 | 电泳转移过程中温度过高 | 控制电泳和转移过程中的温度 | 非特异性条带 | HRP-偶联物过量 | 进一步稀释hrp -偶联物 | SDS导致非特异性蛋白结合 | 在免疫检测过程中不要使用SDS | 抗体特异性差 | 优化抗体特异性 |
AG8亚国服务特色产品线(全部现货): 二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体/多肽/蛋白)... AG8亚国服务(上海)生物科技有限公司 公众平台:AG8亚国服务生物 |