霍乱毒素 霍乱毒素由(Cholera toxin,CT)天然六聚体蛋白的分子量约为85 kDa,由两个亚单位组成,即单个A亚单位(CTA)和五个B亚单位(CTB)。A亚单位(~27.2 kDa)是霍乱毒素的活性部分,B亚单位排列为五聚环,具有明显的5倍对称性,与细胞表面受体结合和酶组分的后续内化(跨膜转运)有关。 霍乱毒素由霍乱操纵子(ctx)编码,从5到3方向,依次是反激活因子ToxR的识别序列、启动子、A基因(ctxA)、B基因(ctxB)和不依赖于r因子的转录终止系列。现在普遍认为操纵子中只有一个启动子,ctxA和ctxB位于同一个转录单位中。在霍乱弧菌中,ctxB基因的表达水平是ctxA 基因的5倍,克隆的ctx操纵子在大肠杆菌中表达时,B基因的表达水平是A基因的6倍以上。 霍乱毒素B亚单位 霍乱毒素B亚单位基因(CtxB)序列长约380bp,一共编码124个氨基酸,其中前21个氨基酸为信号肽序列。对CtxB基因编码的124个氨基酸序列进行计算机软件二级结构分析,前17个氨基酸具有明显疏水性,形成一个a螺旋和一个b折叠。第21位的Gly和Thr亲水性较强,露于分子表面,有利于信号肽酶的切割。
应用 霍乱毒素及其纯化的A亚单位经常用于研究信号转导机制。此外,霍乱毒素通过刺激B淋巴细胞发挥辅助作用。霍乱毒素B亚单位单独用于神经研究中的追踪,利用GM1神经节苷脂结合和逆行运输。经霍乱毒素处理的组织培养细胞不会被杀死,动物组织也不会坏死。
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