全国服务咨询热线:

article技术文章
首页 > 技术文章 > mRNA疫苗研究明星爆品——T7 RNA聚合酶

mRNA疫苗研究明星爆品——T7 RNA聚合酶

更新时间:2021-12-03      点击次数:1406
T7 RNA Polymerase,即T7 RNA聚合酶,是T7噬菌体DNA编码的酶,对T7启动子序列具有高度特异性。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶,具有 5′→3′的RNA聚合酶活性,可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
产品特点:
该酶对T7启动子具有高度特异性,不识别其它生物来源的启动子。可以识别修饰的核苷酸,例如生物素标记、荧光素标记、放射性同位素、地高
标记dNTP,用于各种标记RNA的合成,进行下游实验。

质量保证:

1.SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,毛细管电泳检测纯度在95%以上;
2.酶动力学实时荧光法显示无DNA酶及RNA酶污染;
3.光度测定法显示内毒素含量≤10 EU/mg。

纯度验证


RNA酶残留定量检测

T7 RNA聚合酶RFURFU平均值CV%Ratio
DNA酶残留定量检测
T7 A67307112.516.9146.65
7495
T7 B618862040.7315.8
6220
T7 absin5991621810.3525.81
6445
RNA酶残留定量检测
T7 A18726179186.37731.1
17110
T7 B5359941543.541.0392.56
29488
T7 absin2254521289.58.341.31

应用实例
【RNA体外转录合成】

1. 在RNase free的离心管中加入右侧表格中各组分配制反应体系
2. 将上述反应液混合均匀,低速离心至管底,37℃孵育4个小时。若转录本长度小于100 nt,增加反应时间至4-8个小时;
3. 转录后取样品进行凝胶电泳,取样1µL稀释到5 µL,然后用1%的琼脂糖凝胶进行检测,以确定转录是否成功.
4. 反应完成后,加入DNase 1 (RNase free) , 37 ℃孵育30 min以去除模板DNA.
注:
(I)为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5‘突出末端.
(2)反应体系于室温配置。由于10xTranscription Buflfer中含有亚精胺,低温下亚精胺浓度过高容易引起DNA模板沉淀,建议最后加入模板DNA.
(3)建议在PCR仪中进行反应,为防止蒸发,建议开启热盖功能.
(4)使用试剂、容器等无RNA酶污染。 

组分体积
DNase RNase-Free WaterUp to 20 µL
ATP/CTP/GTP/UTP(100mM each)2µL each
10x Transcription Bufler2 µL
DNA template0.5-2µg
RNase Inhibitor (40 U/µL)0.5 µL
Inorganic PyTophosphatase(0.1U/µL)0.5µL
T7RNA Polymerase (1000 U/µL)0.2 ~ 1 µL
Mg2+ (400 mM)1 µL
Total Volume20 µL


产品信息

货号名称规格
abs60153T7 RNA 聚合酶50KU/200KU/1000KU


更多相关产品推荐:

货号名称规格
abs60154Trizol100ml/500ml
abs9331Trizol(总RNA抽提试剂盒)100ml
abs601510cDNA第一链合成预混试剂(含去基因组)50T/200T
abs600362×Taq PCR Mix(红色染料)1ml×5/1ml×20/1ml×50
abs6015112 × 预混实时荧光定量快速PCR反应体系1.7ml*3
abs6015122 × 预混实时荧光定量快速PCR反应体系(高浓度ROX)1.7ml*3
abs6015132 × 预混实时荧光定量快速PCR反应体系(低浓度ROX)1.7ml*3
abs60157全能核酸酶10 KU/25KU
abs44075719T4 DNA连接酶20KU/100KU/500KU
abs60200 快速内切酶ApaLI多种规格
abs60152牛痘病毒加帽酶500U/2000U/10000U
abs60153T7 RNA 聚合酶50KU/200KU/1000KU
abs60155Pseudo-UTP10ul/50ul/1ml
abs60156N1-Methyl-Pseudo-UTP10ul/50ul/1ml


AG8亚国服务(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:wulan@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息