怎么处理细胞培养板里面的细胞总是聚集在周边的问题

　　细胞培养板根据底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V 细胞培养板型)

　　平底的什么类型的细胞都可用﹐但当细胞数目较少﹐如做克隆时﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等实验时﹐无论贴壁 和悬浮细胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞溷合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐ 因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。

　　圆底培养板主要用于同位素掺入的实验，需要用细胞收集仪收集细胞的培养。

　　细胞接种培养板，细胞总是聚集在周边部分，该如何处理啊？

　　先看下自己的细胞是如何混匀的？是滴管吹打还是振荡培养板？如果是后者，而且是转圈摇匀的话，很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分，导致细胞中间少，四周多！

　　这里提供一个好办法：在培养种板之前，把培养板放入培养箱里进行几个小时的饱和后再取出，种入细胞时力量要轻，可采取用滴头在培养板孔的侧面慢慢加入让细胞悬液流入板孔中，培养的细胞基本是均匀生长。记住千万不要用振荡器振荡，否则你的细胞就会想你说得那样聚积在一起。

　　培养板孔直径愈小，这个现象越明显，24、96孔板这种现象不可避免，因为液体的附壁使得孔内培养液不是成一个液平面，而是周边高，就像凹镜一样，而使用这两种孔板由于需要加干预等原因而不能加足量培养液，使得细胞随培养液一起出现“边集”现象，如果为了使孔中央也有均匀细胞而增加接种细胞数量的话，这要看你需要观察何种指标，如果是MTT ，免疫组化的话会因为细胞成层而影响结果。

　　消化细胞时要注意吹打均匀，避免细胞成团，而且孔内培养液量要足够，一般接种时加足量培养液，加干预时换一次液，干预液加培养液量等于接种时培养液量，这样的话“边集”现象会有所改观，不妨一试。