细胞消化液的使用方法介绍
更新时间：2022-07-20 点击次数：1328
一般细胞长至80%-90%密度则需要传代消化，贴壁细胞传代前，需要把细胞用消化试剂从培养容器表面解离出来，细胞得以分离成单个悬液传代至含新鲜培养基的新容器内。
细胞消化液使用原料为基因工程方法生产的胰蛋白酶，无动物源性，无病毒污染可能性，且内毒素水平低于药典标准（<0.06EU/mL）。可以替代动物源性胰蛋白酶。可用于哺乳动物细胞、间充质干细胞等原代细胞。
使用方法：
1、在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到90%，即可传代。
2、在超净台/安全柜中，吸走培养瓶中旧的培养液，加入PBS溶液洗一次，加入细胞消化液使之*覆盖皿/瓶底。
3、室温孵育4-5分钟或37℃孵育2-3分钟（不同细胞类型消化时间略有差异），显微镜下观察到大部分细胞边缘开始脱离皿/瓶底。
4、加入与消化液等倍体积细胞培养基，用移液器轻轻吹打瓶壁上未*脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞*分散。
5、将细胞悬液转移到离心管中，1200rpm离心3min。
6、弃上清，加入对应细胞培养液，重悬细胞，按比例进行传代，均匀铺在培养皿/瓶中，置于37℃，5%CO2条件下培养。
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