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说一说解离液在细胞分离中的作用

更新时间:2022-07-25      点击次数:3111
  组织解离液是由多种生物酶组成的混合物,可温和、快速、高效地将组织中的结缔组织酶解并释放出细胞,形成细胞悬液。组织解离液适用于脾脏、肝脏、肾脏、胰腺、胃黏膜组织、胆囊、肿瘤组织等多种组织的细胞分离。解离组织获得的细胞具有高活性,可保留细胞的表面抗原等特点,细胞可用于细胞培养、细胞分选、药物筛选、单细胞测序等。
  解离液常用于根尖等细胞的涂片,它能使细胞壁中层(果胶质)溶解,而使细胞分开。
  解离就是用要药液使组织的细胞相互分离开来,便于最后制片时能被压成一薄层进行显微观察。解离液中酒精的作用是迅速杀死细胞,固定细胞的分裂相(将洋葱根尖剪下后,如果不立即投入固定液中将其杀死并令其各种细胞结构凝固,那么,整个根尖将一个分裂期细胞也找不到!);而盐酸能溶解果胶,从而使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。另外解离时间不宜过短,否则根尖未充分解离,压片时细胞分不开;但又不能太长,否则使根尖过分酥软,无法进行漂洗和染色,且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关键。
  漂洗的目的是去除根中多余的解离液,特别是盐酸,防止解离过度,破坏染色体结构。(注:不是因为染色时用的是碱性染料龙胆紫,酸与碱发生反应会影响染色效果,龙胆紫溶液呈酸性,而碱性染料是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂,反之则为酸性染色剂。)
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