类器官原代培养全流程

更新时间：2022-11-17 点击次数：934

准备工作

1.仪器设备

CO2 培养箱、双人单面超净台、倒置显微镜、台式冷冻离心机、水浴锅、水浴摇床，医用冰箱、-80°冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科镊。

2.试剂耗材

小肠类器官培养基，小肠类器官消化液，小肠组织保存液，小肠类器官缓冲液，硫酸庆大霉素，双抗，组织固定液，基质胶，60mm细胞培养皿， 100μm滤筛，15ml离心管，1.5ml EP管若干，4度冰盒，眼科剪刀，眼科镊。

操作流程

1.类器官操作流程之——样本准备

（1）将组织放入含有器官保存液的取样瓶中，4℃从医院/实验室取回。

（2）将取样瓶消毒，组织取出放入培养皿样本拍照，并登记，大小，颜色，软硬程度，组织类型等信息。

2. 类器官操作流程之——清洗-剪碎

添加含有双抗、庆大霉素的类器官缓冲液浸泡，用眼科镊刮去肠道粘膜，肠绒毛等。在培养皿中用类器官缓冲液清洗三次（每次更换培养皿）后剪碎，剪成大约1mm3的组织块。静置2次。

3. 类器官操作流程之——消化-过滤

（1）用组织消化液在37℃进行消化10-15min（消化过程中随时观察消化情况）。

（2）类器官缓冲液终止消化，用枪头轻柔吹打可以看到液体变浑浊。

（3）使用100μm孔径的筛网进行过滤，取少量滤液在镜下进行观察，可以看到明显的隐窝状组织结构。

4. 类器官操作流程之—离心、加胶。

基质胶计算：第3步后观察收集到的组织体积，添加25倍组织体积的基质胶。

5. 类器官操作流程之——铺板

加500-750μl 类器官培养基培养

6.类器官操作流程之——观察

本期推荐

类器官培养基试剂盒

培养简单：培养基集成多种因子，无需添加其他因子和再优化；

扩增效率高：培养的类器官能够快速增长；

维持稳定传代：维持至少3代以上扩增，部分类器官每次传代可实现10代以上扩增；

性价效益比：按照GMP级别生产条件下制备，批次质量稳定，价格优势明显。

货号	品名	规格
abs9446	Organotial乳腺癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9448	Organotial子宫内膜癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9445	Organotial结直肠癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9444	Organotial肝癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9443	Organotial肺癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9449	Organotial胃癌类器官培养基试剂盒	1kit
abs9447	Organotial胰腺癌类器官培养基试剂盒	1kit

基质胶

货号	品名	规格	周期
abs9410	即用型基质胶	100ml	现货
abs9490	基质胶（标准型、含酚红）	1.5ml*8	现货
abs9491	基质胶（标准型、无酚红）	1.5ml*8	现货
abs9492	基质胶（高浓度、含酚红）	1.5ml*8	现货
abs9493	基质胶（高浓度、无酚红）	1.5ml*8	现货
abs9494	基质胶（低因子、含酚红）	1.5ml*8	现货
abs9495	基质胶（低因子、无酚红）	1.5ml*8	现货
abs9496	基质胶（IPS验证无酚红）	1.5ml*4	现货
abs9497	基质胶（高浓度、低因子、含酚红）	1.5ml*8	现货
abs9498	基质胶(高浓度，无酚红，低生长因子)	1.5ml*8	现货

Absin特色产品线：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

上一篇：助力核酸药物开发“黑马”—环状RNA
下一篇：科学培养指南——类器官