组织消化专题——酶的选择

酶解法作为单细胞悬液制备常用方法之一，通过利用特定酶进行相应的化学反应除掉一些特定结构，适合将小块组织消化成为单个细胞。胶原酶是单细胞组织消化的重要酶种。胶原酶消化在单细胞样本制备过程中，是不能缺少的一步。另外，组织解离常见的消化酶还有胰蛋白酶、脱氧核糖核酸酶Ⅰ、透明质酸酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、弹性蛋白酶，不同酶适用于不同的组织类型。

一、胶原酶

胶原酶（Collagenase）主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。目前商用胶原酶是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等不同类型，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。

产品信息：

二、胰蛋白酶

胰蛋白酶（Trypsin）为肽链内切酶，对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用，可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。胰蛋白酶可应用于肝、肾、甲状腺等组织消化，需要配合其他蛋白酶如胶原酶或弹性蛋白酶一起使用。

产品信息：

三、脱氧核糖核酸酶Ⅰ

脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DeoxyribonucleaseⅠ, DNaseⅠ）一般用于酶法细胞分离实验过程中，DNaseⅠ不会破坏细胞完整性。消化因细胞损伤释放到溶液中的DNA，从而增加粘度和活力。

产品信息：

四、透明质酸酶

透明质酸酶（hyaluronidase, HAase）是能使透明质酸产生水解作用酶的总称，是一种能够降低体内透明质酸的活性，从而提高组织中液体渗透能力的酶。常与胶原酶等天然蛋白酶联合，用于解离结缔组织。

产品信息：

五、木瓜蛋白酶

木瓜蛋白酶（Papain）用于细胞培养，在准备细胞培养液的第一步中被用于分离细胞。用酶处理小组织块10分钟后，就可以将连接细胞的细胞外基质打断；然后再用蛋白酶抑制剂来停止反应，防止木瓜蛋白酶进一步裂解细胞本身。相较于胰蛋白酶、弹性蛋白酶，木瓜蛋白酶能讲解大多数蛋白底物，常用作解离皮层神经元、视网膜、平滑肌等组织。

产品信息：

六、中性蛋白酶

中性蛋白酶（Dispase）也称分散酶，来源于枯草杆菌，无支原体或其他动物病毒污染。具有比较温和的蛋白水解酶活性，对细胞损伤小且可维持细胞膜完整性，因此非常适合用于分离原代和继代细胞培养。中性蛋白酶还可用于消除悬浮细胞培养过程中发生的细胞聚集。常与胶原酶或其他蛋白酶结合使用。

产品信息：

七、弹性蛋白酶

弹性蛋白酶（Elastase），是猪胰腺来源的一种丝氨酸蛋白酶，催化蛋白和多肽水解（尤其是仅次于中性氨基酸残基的肽键）。在所有蛋白酶中弹性蛋白酶非常特别的，因其能水解天然弹力素。在血液和细菌内都有发现弹性蛋白酶。研究发现，弹性蛋白酶很适合用来消化肺脏以分离肺泡II型细胞。

产品信息：