支原体清除剂的使用须知
更新时间:2023-07-28 点击次数:1431
支原体清除剂是一种大小仅为 0.2~0.3 μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22~0.45 μm)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到 63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明:当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的 DNA、RNA 及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。本品用于解决因支原体污染而导致细胞污染或状态下降的问题,同时其对于常见的革兰氏阴性和阳性菌也有一定的清除作用。从而确保研究人员的研究结果真实、可信。
支原体清除剂的使用说明:
1、建议现配现用,并保持细胞密度在 50~一60%。
2、推荐稀释比例为1:1000。例如 10 mL的培养基加入10 uL支原体清除剂混匀。
3、弃去旧的培养基,用 PBS将细胞清洗干净,再加入含有支原体清除剂的新鲜培养基,1天1次,连续处理3天;或者2天1次,连续处理5~6天。若细胞污染非常严重时,需延长处理时间。
4、若细胞对支原体清除剂敏感,或生长明显被抑制时,可调整稀释比例,如:1:2000或1:3000。
5、处理完毕后,加入新鲜培养基,培养基中可添加支原体预防剂预防支原体再次污染。
6、因支原体清除剂本身具有广谱抑菌性,为了降低对细胞的影响,强烈建议不要和其它抗生素同时使用。