AG8亚国服务拥有成熟的抗体制备技术以及经验丰富的专业技术人员,提供抗原设计与合成、多肽及小分子偶联、单/多克隆抗体制备、抗体标记修饰、重组抗体表达等一站式抗体制备服务。
一、定制流程
以单抗定制为例,网站提交定制意向单后,技术老师会及时评估项目可行性并免费设计实验方案,点击此处获取定制链接。
二、单抗定制实验设计
1、抗原设计
a. 客户提供正确的NCBI号或蛋白序列;
b. 技术工程师进行抗原设计。跨膜区预测→抗原分析→抗原性质分析→可能的抗原结构→抗原设计可行性建议。
图1 抗原跨膜区预测
2、抗原制备
化学合成多肽,偶联/可溶表达抗原蛋白。
3、抗体制备
a. 动物免疫:每个抗原免疫2只小鼠;
b. 细胞融合:每个抗原取elisa效价高的一只小鼠进行融合;
c. 亚克隆:亚克隆筛选;
d. 细胞建株:筛选出的优质单克隆细胞建株;
e. 打腹水:细胞株打腹水;
f. 腹水纯化:ProteinAG 纯化抗体。
4、数据准备和发货
ELISA 数据;抗体发货。
三、单抗定制文献案例
2023年7月,南方医科大学南方医院普外科李国新等教授团队在国际顶尖的胃肠病学期刊GUT上在线发表题为“Targeting MS4A4A on tumor-associated macrophages restores CD8+ T-cell-mediated antitumor immunity"的研究论文(IF:24.5)。文章发现跨膜4域A亚家族成员4A(Membrane Spanning 4-Domains A4A, MS4A4A)在结直肠癌等多种癌症中由肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)特异性高表达,并与癌症患者的不良临床结局有关。体内抑制MS4A4A和抗MS4A4A单抗治疗均可抑制肿瘤生长,提高免疫检查点抑制剂(ICI)治疗效果。
文章中抗小鼠MS4A4A(3G7)单抗由我司技术人员设计实验方案,并提供最终纯化的抗体。此外,我司还可提供多肽/蛋白定制、标记/纯化等服务。在线提交定制意向表或联系我们,我们会在3个工作日内上传方案到后台,您可以直接登录账号查看。
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四、抗体定制常见问题解答
Q1:定制鼠多抗,最终能得到多少的抗体?
A1:鼠多抗,我们一般是免疫6只小鼠,纯化出来的抗体正常在0.5mg-0.8mg左右。
Q2:你们可以做单B细胞抗体制备吗?
A2:可以。
Q3:我自己提供蛋白做多抗,有什么浓度等方面的要求吗?
A3:浓度不低于0.3mg/mL,总量3mg。
Q4:定制的抗体做WB实验稀释倍数推荐多少呀?
A4:建议先用1:1000做预实验,根据结果再调整稀释比例。
参考文献
Li Y, Shen Z, Chai Z, et al. Targeting MS4A4A on tumour-associated macrophages restores CD8+ T-cell-mediated antitumour immunity[J]. Gut. 2023;72(12):2307-2320. Published 2023 Nov 24. doi:10.1136/gutjnl-2022-329147 PMID: 37507218
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