植物血凝素的生物学功能与应用指南

产品介绍：

植物血凝素(Phytohemagglutinin, PHA)是指从红芸豆(Phaseolus Vulgaris)中提取的一种菜豆类凝集素。它是由4个亚基通过非共价键结合形成的四聚体糖蛋白，包含两种亚基分子，L亚基（白细胞凝集素）和E（红细胞凝集素），含有5种异构体（L4，L3E1，L2E2，L1E3 和E4）。L亚基具有白细胞凝集和高促有丝分裂活性；E亚基具有高红细胞凝集和低促有丝分裂活性。

根据不同的亚基组成，PHA可以分为几种不同的形式，主要包括PHA-L、PHA-E、PHA-P和PHA-M。以下是它们的在科学研究中的主要用途：

PHA-L：

主要功能：PHA-L是纯化的L4四聚体，主要作为T淋巴细胞的刺激原，广泛用于免疫学研究。它可用作INF-γICS、ELISPOT实验的阳性对照；PBMC培养的刺激物；顺行神经示踪剂等。

生物学活性：具有高促有丝分裂活性和白细胞凝集活性，但红细胞凝集活性极低。

应用：主要用于刺激T细胞增殖和免疫反应研究。

PHA-E：

主要功能：PHA-E是纯化的E4四聚体，主要用途是红细胞凝集或者糖基化修饰的研究。

生物学活性：具有高红细胞凝集活性和低促有丝分裂活性。

应用：主要用于红细胞凝集实验和糖基化研究。

PHA-P：

主要功能：PHA-P是在分离和纯化PHA-L和PHA-E前的PHA的蛋白质形式，成分与PHA-M相当。

生物学活性：具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。

应用：主要用于刺激外周单个核细胞增殖，促进某些细胞因子的产生和膜表面蛋白的表达。

PHA-M：

主要功能：PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式，成分与PHA-P相当。主要用于刺激外周单个核细胞增殖，促进某些细胞因子的产生和膜表面蛋白的表达。

生物学活性：具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。

应用：广泛用于免疫学研究，特别是在细胞增殖和细胞因子产生方面。

客户应用实例：

应用一、使用PHA-L(abs47014909)预刺激Jurkat T细胞，探究小分子PROTAC介导靶向蛋白降解治疗STAT3依赖性上皮癌症的机制[1]

将HCT116细胞以1×10⁴个细胞/孔的密度接种到12孔板中进行附着，随后用TSM-1(1μM)处理24h。然后，使用PHA(10μg/mL)和PMA(10ng/mL)预刺激Jurkat T细胞(6×10⁴)4h。HCT116细胞与活化的Jurkat T细胞共培养24h。ELISA试剂盒用于检测上清液培养基中IL-2的水平，IL-2是监测T细胞活化的生物标志物。用结晶紫染色法对潜在的癌症活细胞进行虚拟化。将细胞溶解在10%乙酸中后，使用Cytation 5酶标仪(BioTek)在595nm下对细胞进行定量。

图1  TSM-1在体外诱导T细胞活化和浸润

应用二：使用PHA-M(abs47014911)培养Jurkat T细胞，探究氟化物干扰免疫系统的机制[2]。

Jurkat T细胞(HTX4056，Otwo Biotech)在RPMI 1640培养基中生长，培养基补充了10%胎牛血清(FBS，abs972，Absin)、青霉素-链霉素溶液和5ug/mL植物血凝素-M(abs47014911，Absin)，5ug/mL Ultra LEAFTM纯化的抗人CD28。细胞系在37°C， 5%CO₂和95%空气的加湿培养箱中培养。

图2 氟化物可以抑制T细胞活化，阻碍T细胞受体的内化

PHA的不同形式主要区别在于它们的亚基组成和相应的生物学功能。PHA-L和PHA-E分别具有高促有丝分裂活性和高红细胞凝集活性，而PHA-M和PHA-P则主要用于刺激细胞增殖和细胞因子产生。每种形式在免疫学研究和细胞生物学研究中都有其特定的应用。

[1] Jin J, Wu Y, Zhao Z, et al. Small-molecule PROTAC mediates targeted protein degradation to treat STAT3-dependent epithelial cancer[J]. JCI Insight. 2022;7(22):e160606.

[2] Zhu S, Liu B, Fu G, et al. PKC-θ is an important driver of fluoride-induced immune imbalance of regulatory T cells/effector T cells[J]. Sci Total Environ. 2024;934:173081.

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