实时定量PCR技术(real-time PCR)也叫qPCR(Quantitave PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分析的方法。它是一项临床上非常成熟的技术,目前在分子生物学领域,qPCR核酸定量好方法。目前仍在全球肆虐的SARS-CoV-2鉴定的“金标准"——核酸检测就是通过qPCR原理进行的。
图1 qPCR技术原理简图(图片来自henrik's lab)
那么拿到一个样本,需要经过以下多项操作流程才能定量检测到它的核酸含量。其中任何一个步骤操作失误都会导致它的检测结果出现异常,那让小爱来带您来看下出现常见问题的解答,为您解决qPCR实验中的痛点!
图2 qPCR实验操作流程图
FAQ:
1、无Ct值出现
除了实验操作的解答外,AG8亚国服务拥有全套qPCR解决方案来一站式帮您解决qPCR实验难题。
类别 | 货号 | 产品名称 | 规格 |
样本保存 | abs9268 | RNA样品保存液 | 100mL |
abs60330 | RNA保护因子 | 50T | |
RNA提取纯化 | abs9331 | Trizol(总RNA抽提试剂) | 100mL |
abs60027 | 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50T | |
abs60030 | 病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 | 50T | |
abs60028 | 植物RNA快速提取试剂盒(DNase Ⅰ) | 50T | |
abs60029 | 全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50T | |
逆转录 | abs60073 | Reverse Transcriptase | 10000U/10000U×5 |
abs60076 | Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge) | 50T/100T | |
abs60246 | 逆转录一管化三代预混液 | 100T | |
qPCR | abs60309 | 一步法超级多重荧光定量PCR试剂盒(探针) | 100T/250T |
abs60310 | 一步法超级荧光定量PCR试剂盒(探针) | 100T/250T | |
abs60093 | Multiplex Probe One Step qRT-PCR Kit | 100T/500T | |
abs60086 | SYBR High-Sensitivity qPCR SuperMix | 1mL×5/1mL×25 | |
abs60087 | SYBR qPCR SuperMix Plus(High ROX Premixed) | 1 mL×5/1mL×25 | |
abs60088 | SYBR qPCR SuperMix Plus(Low ROX Premixed) | 1 mL×5/1mL×25 | |
abs60247 | 抗体染料法定量PCR预混液(通用ROX) | 5×1mL | |
abs60303 | 染料法荧光定量PCR试剂盒(化学修饰) | 100T/200T/500T | |
abs60304 | 染料法荧光定量PCR试剂盒(抗体修饰) | 100T/200T/500T | |
abs60305 | 探针法荧光定量PCR试剂盒 | 100T/200T/500T | |
abs60306 | UDG探针法荧光定量PCR试剂盒(防污染系统) | 100T/200T/500T | |
abs60307 | 超级多重荧光定量PCR试剂盒(探针) | 100T/200T/500T | |
abs60308 | UDG多重探针法荧光定量PCR试剂盒(防污染系统) | 100T/200T/500T |
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