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生化检测试剂盒 | 铜离子检测助力肿瘤治疗研究

更新时间:2023-12-05      点击次数:697

背景介绍:

 

铜浓度检测在药物发现和环境监测中得到广泛应用。铜是人体必需的微量元素。铜蛋白酶在铁和儿茶酚胺代谢,在清除自由基,血红蛋白,弹性蛋白,胶原等方面扮演着重要角色。铜主要存在于肝脏中的铜蓝蛋白中。铜含量过低会导致智力低下、色素缺失、贫血、肌肉紧张症、骨质坏血病等疾病。

 

铜离子检测在肿瘤研究中的应用:

 

历史研究表明,铜稳态失调与多种肿瘤有关,如妇科肿瘤、结直肠癌等,而癌症患者血清铜水平的升高与癌症分级和化疗耐药性有关,如果铜的浓度超过一定的阈值,就会中毒,导致一种新细胞死亡形式,称为铜中毒,这种方式也被视为癌症治疗的潜在方法。

 

2023年10月20日,上海市第一人民医院黄陈教授和范广建教授团队在Nature Communications杂志上发表了题为“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer"的研究论文。本研究揭示了METTL16调控胃癌细胞铜死亡的分子机制,阐明乳酰化修饰及m6A修饰在胃癌进展中的重要意义,为胃癌的治疗提供新的靶标和策略。


图 运用铜离子检测试剂盒abs580140对48例胃癌患者的胃癌组织裂解物进行了铜含量检测

 

铜离子检测试剂盒:


试剂盒组分

规格

储存条件

96-Well Microplate

1 plate

常温

Assay Buffer

30 mL x 4

4℃

Reaction Buffer

4 mL x 1

4℃

Masking Reagent

Powder x 1

4℃

Dye Reagent

Powder x 1

4℃,避光保存

Dye Reagent Diluent

1 mL x 1

4℃

Standard (250 μmol/L)

1 mL x 1

4℃




 

另需自备的材料:酶标仪(可读取605nm处的吸光度)、蒸馏水、移液器与枪头、离心机、计时器等。

 

操作步骤(以组织样本为例):

 

1、样本处理:称取1g组织,与1mL Assay buffer在冰上匀浆,10000g 4℃离心10min,取上清液至新离心管中,冰上保存待检测。


2、试剂准备:


标准品:用蒸馏水二倍连续稀释标准品;


图 标准品二倍连续稀释示例

 

Masking Reagent:使用1mL蒸馏水溶解(现配现用);
Dye Reagent:使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent,70℃加热助溶(现配现用)。


3、上样:分别将140uL不同浓度的标准品、样品加入相应孔中,另设置空白孔加入140uL蒸馏水;每孔分别加入40uL Reaction Buffer,10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent,混合均匀,室温孵育15min。

 

试剂

标准品孔

样品孔

空白孔

标准品

140uL

--

--

样品

--

140uL

--

蒸馏水

--

--

140uL

Reaction Buffer

40uL

40uL

40uL

Masking Reagent

10uL

10uL

10uL

Dye Reagent

10uL

10uL

10uL

 








4、检测与计算:使用酶标仪测量605nm处的吸光度,拟合标准曲线并计算样本浓度。


图 标曲示例

 

注意事项:

 

1)金属螯合剂(如EDTA)会干扰此分析,在样品制备中应避免使用;
2)对于未知的样品,建议多做几个稀释梯度进行预实验,确保读数在标准曲线范围内;
3)试剂盒中的Dye Reagent需要现配现用,配好的溶液无法储存,可能影响显色读数进而影响检测;如果样本需要分批检测,建议分批收样储存,待样本收齐后统一检测;
4)每次实验必须重新检测并绘制标准曲线。


Absin生化检测试剂盒——离子检测系列:


货号

品名

用途

abs580105

铁离子检测试剂盒

铁离子(Fe3+)含量检测

abs580140

铜离子检测试剂盒

铜离子(Cu2+)含量检测

abs580188

硒离子检测试剂盒

硒离子含量检测

abs580103

钾离子检测试剂盒

钾离子(K+)含量检测

abs580104

钙离子检测试剂盒

钙离子(Ca2+)含量检测

abs580106

镁离子检测试剂盒

镁离子(Mg2+)含量检测

abs580107

磷离子检测试剂盒

磷离子含量检测

abs580108

锌离子检测试剂盒

锌离子(Zn2+)含量检测

abs580110

孔雀绿磷离子检测试剂盒

孔雀绿磷离子含量检测

abs580146

铬离子检测试剂盒

铬(Cr)离子含量检测





 

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WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

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