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| 品牌 | absin | CAS | - |
|---|---|---|---|
| 分子式 | - | 纯度 | - |
| 分子量 | - | 货号 | abs60256 |
| 规格 | 0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂 | 应用领域 | 生物产业 |
产品介绍：
这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能，可高效转染多种原代细胞，转染效率高达70%以上（EGFP质粒）。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，这款产品采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。
产品特点
1、强大的细胞转染性能：可高效转染多种原代细胞，转染效率可高达85%以上；
2、 极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；
3、操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。
方法步骤（以24孔板转染为例）:
A、细胞接种:
1、转染前24小时左右对细胞进行转接，培养过夜；
2、确保转染时细胞密度为90%左右；
3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育 阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
B、PM /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的转染 试剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，轻轻混匀，再加入适量的DNA，见附表。用移液器再次轻轻 混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分后，立即转染。注意： PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。
注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。
C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察，最佳观察或收获时间为24~48小时。
3、PM在培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基，请于加入PM /DNA复合物12~24小时后进行。
附表：不同培养体系推荐初始转染条件
| 培养皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
| 表面积cm2 | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
| Trans buffer、试剂、DNA 量 | Trans buffer(μl) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
| PM(μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5 | 10 | 50 | |
| 1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
| 培养基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 10 | |
储存/保存方法：
-20℃避光保存，Trans buffer 可保存于2-8°C，有效期1年，使用前轻轻混匀。
试剂盒包装：
| 货 号 | PM试剂 | Trans buffer |
| abs60256-0.1ml | 0.1ml | 4ml |
| abs60256-0.5ml | 0.5ml | 20ml |
| abs60256-1.0ml | 1.0ml | 40ml |
| abs60256-1.5ml | 1.5ml | 60ml |
产品用途：
大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等。
* 注意： 本产品仅用于科研实验
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