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PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒

简要描述:这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种原代细胞,转染效率高达70%以上(EGFP质粒)。

  • 产品型号:abs60256
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-07-09
  • 访  问  量:690

详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs60256
规格0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml供货周期现货
主要用途专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂应用领域生物产业

产品介绍:
这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种原代细胞,转染效率高达70%以上(EGFP质粒)。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,这款产品采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。

产品特点

1、强大的细胞转染性能:可高效转染多种原代细胞,转染效率可高达85%以上;
2、 极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;
3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。


方法步骤(以24孔板转染为例):

A、细胞接种:
1、转染前24小时左右对细胞进行转接,培养过夜;
2、确保转染时细胞密度为90%左右;
3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育 阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。


B、PM /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer,再加入适量的转染 试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer,轻轻混匀,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻 混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分后,立即转染。注意: PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。

注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。


C、转染:

1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察,最佳观察或收获时间为24~48小时。
3、PM在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基,请于加入PM /DNA复合物12~24小时后进行。

附表:不同培养体系推荐初始转染条件


培养皿96 孔板48 孔板24 孔板12 孔板6 孔板10cm 皿
表面积cm20.351.01.93.89.659
Trans buffer、试剂、DNA 量Trans buffer(μl)20501002004002000
PM(μl)0.51.32.551050
1μg/μl plasmid (μl)0.160.40.81.63.216
培养基(ml)0.10.250.51.02.010



储存/保存方法:

-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,有效期1年,使用前轻轻混匀。


试剂盒包装:

货 号PM试剂Trans buffer
abs60256-0.1ml0.1ml4ml
abs60256-0.5ml0.5ml20ml
abs60256-1.0ml1.0ml40ml
abs60256-1.5ml1.5ml60ml


产品用途:

大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等。

* 注意: 本产品仅用于科研实验


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