染色质免疫共沉淀技术的原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。一、细胞交联与裂解在装有20ml生长培养基的150mm培养皿中培养贴壁细胞，长到80%-90%密度，约107个细胞。如有必要，可进行刺激或处理。建议采用1×106个细胞作为一次ChIP的细胞量。1）在20ml培养基中加入终浓度为1...

一、前言：多重荧光免疫组化(mIHC)主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大，是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。用这种方法做多重荧光染色是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素，该荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后进行微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第...

膜蛋白是结合或整合在细胞膜或细胞器上的一类蛋白，在各种重要的生理活动中发挥着重要作用。人类基因组约三分之一的基因都用于编码膜蛋白[1-2]。作为生物膜功能的主要承担者，膜蛋白负责细胞内外和细胞间的物质运输、能量传递和信息传导等。其功能紊乱常常与人类重大疾病相关，因此膜蛋白是一类非常重要的药物靶点。图1细胞膜结构示意图去垢剂也称为表面活性剂，是一类同时具有亲水头部和疏水尾部的分子，能够使脂膜解体释放膜蛋白并维持去膜状态下膜蛋白结构和功能的稳定性。去垢剂的双极性和理化特性如临界胶...

2023年7月17日，武汉大学郑凌、华中科技大学黄昆及陈红共同通讯在NatureCommunications发表题为“ArenalYY1-KIM1-DR5axisregulatestheprogressionofacutekidneyinjury”的研究论文，该研究报道肾小管特异性敲除Kim1可减轻顺铂或缺血/再灌注诱导的雄性小鼠急性肾损伤。在机制上，在AKI上下调的转录因子阴阳1(YY1)与KIM1的启动子结合并抑制其表达。近年来，肾病作为继肿瘤、心脏病之后的第三大“杀手”...

质粒小科普质粒(Plasmid)是广泛存在于生物界中的环状双链DNA分子。目前在细菌、放线菌、真菌和不少动植物细胞中均发现有质粒的存在，其中细菌质粒是研究最深入、应用较广泛的[1]。因为质粒分子本身具有复制功能的遗传结构，可携带一些遗传信息，并且其自我复制能力和携带遗传信息能力非常强大，经过基因表达后可使其宿主细胞表现相应的性状，所以质粒常被用作基因载体，在分子生物学、生物化学与细胞生物学等学科中得到广泛的应用[2]。图1大肠杆菌质粒分子结构示意图质粒提取方法及原理质粒的提取...

HaCaT细胞是人类永生化表皮细胞，由角质形成细胞培育而来的，保留了角质形成细胞分化能力，是非肿瘤来源的人正常皮肤永生化角质形成细胞株，与正常人角质形成细胞分化特性相似，可以繁殖150代以上，但不是肿瘤细胞，不具有肿瘤特性。细胞名称HaCaT（人永生化角质形成细胞）细胞来源一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤形态上皮细胞样生长特性贴壁生长营养体系89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清优级(abs972)+1%双抗(abs9244)+0.2%牛脑垂体提取物(ab...

低密度脂蛋白（LowDensityLipoprotein，简称为LDL）是血液中五种常见脂蛋白之一，由极低密度脂蛋白(VLDL)通过脂蛋白脂肪酶(LPL)的作用使其丧失部分甘油三酯转化而来。LDL是主要的胆固醇和胆固醇酯转运体，占血浆脂蛋白总量的一半以上，其通过低密度脂蛋白受体(LDLR)介导的内吞作用被肝脏和其他组织吸收。研究表明低密度脂蛋白在动脉壁内的异常蓄积及其诱发复杂免疫炎症反应过程，不仅是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生的始动环节，更是最终导...

一、免疫荧光的原理免疫荧光(Immunofluorescence，IF)技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受外来激发光的照射而发生明亮的荧光（黄绿色或橘红色），可以看见荧光所在的组织细胞，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。二、IF分类中文全称缩写中文全程实验...