随着2015年精准医疗计划的提出，液体活检技术备受关注。液体活检常见的三种有效素材主要有：游离DNA（circulatingcell-freeDNA，cfDNA）、循环肿瘤DNA（circulatingtumorDNA，ctDNA）和外泌体。图1液体活检方案。人体血液中含有细胞、胞外膜囊泡（EMVS）、游离DNA（cfDNA）、游离RNA（cfRNA）和蛋白质，可作为各种疾病的生物标志物一、什么是游离DNA?游离DNA又称循环DNA、无细胞DNA，是指存在于血浆、血清或尿液等...

蛋白酶是一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中，它作为消化酶而发挥作用。胰腺是人类体内能合成和储存大量胰蛋白酶的器官。当我们摄入食物时，胰腺就会分泌出含有胰蛋白酶的胰液，协同其他酶类一起将食物分解成更小的分子，促进食物被吸收和利用。胰蛋白酶的分子式为C52-H90-N18-O20-S1，分子量为5110.85Da。它由三个多肽链组成：A、B、C。其中，链A和链B之间通过二硫键连接起来，组成酶的主体结构；链C，则是一个多余的序列，与酶的催化活性无关。在胰腺细胞中，胰蛋白酶是以不活性...

一、我是谁？外泌体是由所有细胞释放的一类胞外囊泡，比细胞小很多，大小范围为40—150nm。与细胞类似，外泌体由脂质双分子层膜构成，膜上含有各种标志性蛋白，可用于外泌体的鉴定和分离。内含物中包含特定蛋白质、RNA（mRNA、miRNA、IncRNA等）和DNA，其中miRNA的占比最多。外泌体除了存在于血浆、血清、尿液、脑脊液等人体体液中，还存在各种组织中，可以说外泌体在人体中无处不在。图1外泌体的组成二、我的功能有哪些？外泌体的功能取决于它们与受体细胞相互作用的能力，并将它...

黑胶虫污染是一个老生常谈的话题。目前，科研界对黑胶虫的污染特征没有统一的判定标准，通常污染特征总结有：1）活跃游动或旋转梭动或原地颤动（如视频1、2、3所示）；视频1活跃游动视频2旋转梭动视频3原地颤动2）呈杆状、球状、卵圆状；3）培养基不浑浊；4）复苏或传代时往往会出现黑胶虫污染，并且与细胞呈现此消彼长的现象。我们对多个黑胶虫样本进行测序鉴定，这里举两个典型鉴定结果给大家分享：图1Sphingomonas（鞘氨醇单胞菌）单个及菌落图属名样本2，15，21，27鉴定为Sphi...

一、肺癌类器官构建——Organotial人肺癌类器官培养基试剂盒（abs9443）（1）取材后的组织须放在预冷的（2-8°C）组织保存液的取样瓶中，快速转运至洁净实验室进行组织处理和细胞分离，拍照并登记信息。（2）准备若干培养皿，加入4℃预冷的原代培养缓冲液备用。（3）取样瓶消毒，将组织放入培养皿中，利用原代培养缓冲液清洗三次后，去除杂质，利用眼科剪或手术刀将组织剪切成体积约为1-3mm3的组织块。（4）组织用人肺癌原代组织消化液消化，37℃震荡消化10-20min（消化过...

Accutase细胞消化液是包含蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液，不含任何动物和细菌来源组分。作为胰酶-EDTA消化液的替换产品，用于从常规组织培养器皿、粘附包被培养器皿和聚合物上消化细胞。Accutase比哺乳动物源的胰酶和胶原酶更加有效，因其所含活性成分浓度更低，对细胞伤害更小且更温和，但能维持相同效力。使用方法：1、4℃或冰浴融解Accutase，之后进行分装保存。【注】：不可37℃融化本品，否则会影响酶活。2、使用不含钙、镁的1×Dulbecco'sPBS润洗细...

组织解离液是一种化学试剂，用于将组织样本中的细胞分离开来，从而得到单个的细胞或细胞群。它广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。本文将介绍组织解离液的作用机理、常用类型以及在不同领域中的应用。作用机理：组织解离液可以通过破坏细胞外膜或细胞间质来使细胞分离。其中最常见的组织解离液成分包括胰蛋白酶、卡介苗、DNA酶、胶原酶等酶类，以及EDTA、EGTA等螯合剂，这些成分可以使细胞脱离基质并保持其完整性。常用的组织解离液包括胰蛋白酶、卡介苗、DNA酶、胶原酶等。1.胰蛋白...

在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织等进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞即原代培养。在进行传代培养时，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个的细胞。那么“胰蛋白酶”和“胶原蛋白酶”到底有什么区别呢？我们在细胞培养时应该如何选择？尽管胰蛋白酶和胶原蛋白酶都是细胞培养中常用于将体积较小的组织块分散成细胞团或单细胞的消化液，但它们的作用机制及适用情况并不相同。一、胰蛋白酶的作用特点胰蛋白酶分离自牛、猪等动物的胰，...