1、标本固定：固定的目的是：①，防止标本从玻片上脱落；②，除去防碍抗原—抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③，固定的标本易于保存。固定剂的选择一般用4%多聚甲醛。2、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高）充分脱水、对组织要*浸蜡、切片时刀片要干净和锋利。否则容易裂片和脱片等。3、脱蜡和水化：这是为了后面的抗体等试剂能够充分与组织中抗原等结合反应。脱蜡可以先60度20min，然后立即二甲苯1-3分别10min，但当天制好的切片可以60度3-4h。...

Q:什么是霍乱毒素？A:霍乱毒素由（Choleratoxin,CT）两个亚单位组成，即A亚单位（CTA）和B亚单位（CTB）。A亚单位是霍乱毒素的活性部分，B亚单位的主要功能是通过与哺乳动物小肠上皮细胞上的单唾液酸神经节苷脂GM1结合而使得A亚单位进入细胞。Q:霍乱毒素是如何反激活的？A:霍乱毒素由霍乱操纵子（ctx）编码，从5'到3'方向，依次是反激活因子ToxR的识别序列、启动子、A基因（ctxA）、B基因（ctxB）和不依赖于r因子的转录终止系列。现在普遍认为操纵子中只...

血清小知识血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出...

检测某一个基因的表达产物或者要比较表达产物量的相对变化，方法是westernblot。而WesternBlot试验中比较这些的前提条件是等量的细胞上样，这样才有比较的基础。而人为的操作会产生一定的误差，这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参来校正。因此选择一个合适的内参抗体来校正上样误差是非常重要的。所以严谨的WesternBlot实验设计中需要有良好的参照体系，后续的实验结果分析才具有说服性。在WesternBloting实验中，可能内参即是内部参照(Intern...

激动剂抑制剂可抑制肠神经系统释放ACh,减缓胃肠道动力.在健康人，哌波色罗能对抗西沙必利对结肠的促动力作用，延缓结肠传输，但不改变结肠的感觉和顺应性；拮抗外源性.5-HT所致的肠道蠕动反射。在腹泻型IBS患者中，哌波色罗可以延长口-盲传输，使结肠蠕动减弱，降低直肠敏感性，从而改善患者的症状。激动剂抑制剂可升高触发小肠蠕动的压力感受阈值和降低小肠壁的顺应性。Meuse等发现在脊髓背角浅层初级传入神经末梢有5-HT7受体的表达，参与大鼠伤害性感受器的激活。目前尚无5-HT7受体制...

细胞因子还广泛效果于神经,内分泌系统,对细胞间相互效果、细胞的增殖分解和效应功用有重要的调节效果.细胞因子发挥广泛多样的生物学功用是经过与靶细胞膜外表的受体相结合并将信号传递到细胞内部.因此,了解细胞因子受体的结构和功用关于深入研究细胞因子的生物学功用是*的.跟着对细胞因子受体的深入研究，发现了细胞因子受体不同亚单位中有同享链现象，这对说明很多细胞因子生物学活性的相似性和差异性从受体水平上提供了根据。绝大多数细胞因子受体存在着可溶性方式，把握可溶性细胞因子受体发生的规则及其生...

在westernBlot过程中，蛋白Marker虽然是其中小小的一环，但是这个小细节对实验结果的影响不可忽视。Marker在蛋白电泳中的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量无误，实验结果才有说服力。此外，Marker还能显示转膜是否成功以及蛋白在凝胶上的电泳程度的作用。因此选择正确的蛋白Marker也是westernblot实验成功的必要条件之一。总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。未染色的蛋白分子量标准未染色的...

淋巴细胞分离液取新鲜抗凝血1ml，与生理盐水1:1混匀后，小心加于2ml细胞分离液之液面上；以400g（约1500转/分，半径15cm水平转子）离心20分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。*层：为血浆层。第二层：为环状乳白色淋巴细胞层。第三层：为透明分离液层。第四层：为红细胞层。收集第二层细胞放入含生理盐水4-5ml的试管中，充分混匀后，以400g（约1500转/分）离心20分钟。沉淀经2次洗涤后即得所需淋巴细胞。淋巴细胞分离液方法，取肝素抗凝血1ml加Hanks液1m1稀...