组化笔特征，防水，热稳定，使试剂定位于细胞和组织切片上特定的位置，避免试剂浪费。浅蓝色，容易识别，可溶解于二甲苯及二甲苯替代物，方便清除，环保，不含碳氟化合物和氯碳化合物等破坏臭氧层的物质。组化笔使用方法，先将组织切片脱蜡水化，然后用薄纸抹去在玻片上的组织边缘的液体，再用免疫组化笔在玻片上被检体周围画圈或在组织边缘上下各画一条线，干燥10-15秒，之后将玻片浸在PBS耐热性能，试验过程中的耐热性为120摄氏度以下。石蜡组织切片的画圈，切片脱蜡水化，PBS冲洗，甩干PBS液，在...

鸡胚提取物抗凝作用，静脉注射木瓜蛋白酶可引起组织胺释放，延长血凝时间，防止发生休克。从浆计中获得的蛋白性物质无论试管试验或整体试验均有显著的抗凝作用，在抗凝剂量时(狗，2mg/kg)，对心血管及呼吸系统无明显作用，大剂量对心脏有直接抑制作用。由于过敏及引起回肠痉挛，其治疗应用仍受限制。鸡胚提取物蛋白酶的作用，木瓜蛋白酶，能帮助蛋白消化，可用于慢性消化不良及胃炎等。亦可用于腹腔注射防治粘连，动物试验证明其防治粘连再发的效果比胰蛋白酶好。未成熟果实的浆汁在炭疽病灶中能消化损坏的组...

β-Tubulin即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin，其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体，是形成微管的zui主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa，其实际检测条带均在55kDa左右。β-tubulin抗体被广泛用于WesternBlotting时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。β-Tubulin抗体的英文别名...

Marker，染色及内参等相关问题Q：用的是预染marker，但是电泳总跑不全8条带，请问什么原因？怎样改善？胶用过8％，10％，12％，都是这样。marker是新买的。A：一般来说，是小分子量Marker跑走了，可以增加胶浓度或减少电泳时间。梯度胶也是不错的选择。（梯度凝胶AG8亚国服务就可提供呦）Q：WesternBlot哪种染色好？A：（1）阴离子染料是zui常用的，特别是氨基黑，脱色快，背景低检测极限可达到1.5μg，考马虽然与氨基黑有相同的灵敏度，但脱色慢，背景高。丽春红S...

针对抗体常见问题Q：做细胞信号传导，要做磷酸化某因子WesternBlot，其二抗有何要求？A：对二抗有无要求，要看你实验条件来选择，一般推荐用HRP标记的二抗。Q：免疫组化和WesternBlot可以用同一种抗体吗？A：免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇（又称表位），有些表位是线性的，而有的属于构象型；线性表位不受蛋白变性的影响，天然蛋白和煮后的蛋白都含有；构象型表位由于受蛋白空间结构限制，煮后变性会消失。如果你所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸，也就是线...

针对样品的常见问题：Q：细胞水平要做WesternBlot，多少细胞提的蛋白够WesternBlot？A：一般地5*106就足够了。Q:同一样品能同时提RNA又提蛋白吗，这样对WesternBlot有无影响?A：能，没有问题的。Q:同一蛋白样品能同时进行两种因子的WesternBlot检测吗？A：当然可以，有的甚至可以同时测几十种样品。Q:如果目标蛋白是膜蛋白或是胞浆蛋白，操作需要注意什么？A:如果是膜蛋白和胞浆蛋白，所用的去垢剂就要温和得多，这时建议加上NaF去抑制磷酸化酶...

Western免疫印迹（WesternBlot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。我们将通过以下几个方面来详细地介绍一下WesternBlot技术：【原理】与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如PVDF膜）上...

预染蛋白marker是WesternBlot实验中常用的一种试剂，那么预染蛋白marker到底是什么？用的时候又有哪些注意事项呢？预染蛋白marker其实就是一些纯化好的蛋白混合物，通过与染料共价耦联，在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白marker的出现方便了我们的实验，可以帮助我们在电泳时、电泳后，以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率。比如使用垂直电泳时*分辨区域大约在胶的2/3处，我们使用预染Marker就可以预测电泳的进程。当目标蛋白进入*分辨区时就可以停止电...